丹参酮ⅡA通过影响SDF-1蛋白对脑出血大鼠灶周神经干细胞作用的研究

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目的:通过观察丹参酮ⅡA对大鼠脑出血灶周SDF-1蛋白的影响,并通过神经干细胞阳性标记物Brdu(5-溴-2’-脱氧尿苷酸),统计脑出血后,出血灶周脑组织阳性细胞的改变,来观察丹参酮ⅡA对脑出血后神经干细胞的作用。  方法:模型制作使用自体血注入法,(借助大鼠脑立体定位仪),总标本为64只雄性SD大鼠,随机分为治疗组16只(脑出血模型+腹腔注射丹参酮ⅡA)、模型组16只(脑出血模型+腹腔注射生理盐水)、假手术组16只(只穿刺不注血,腹腔注射生理盐水)及空白组16只(正常饲养)、在术后3、7、14、28d时间点,分别处死4只,处死前,对大鼠行神经功能评分(Bederson),处死后取出血灶周脑组织,检测SDF-1蛋白含量变化,并通过免疫组化染色测定神经干细胞阳性标记物Brdu阳性细胞数。各组数据以均数标准差((x)±S)表示,两组间比较采用方差分析,有统计学意义时,组间比较采用LSD-t检验,(P<0.05)时,有统计学意义。  结果:根据Bederson评分,可以得出,术后6h-24h间,评分较高,说明神经功能损伤较重,术后除空白组外,其余三组评分约为3分,神经功能障碍比较显著,伴随着时间增加,3个组大鼠Bederson评分逐渐降低,24h到第7d时,治疗组得分下降明显,28d接近正常。免疫组化检测结果显示,脑出血后Brdu阳性细胞在治疗组与另外两组相比增加显著(P<<0.05),模型组与假手术组相比较差异不显著(P>0.05),第7d时治疗组与空白组相比Brdu阳性细胞显著增加(P<0.01)。Brdu阳性细胞于3d时可见显著增加,7d达到高峰,后逐渐下降,28d最低,仍高于其他组。各组大鼠脑内SDF-1蛋白含量测定,脑出血后SDF-1蛋白在治疗组和另外两组相比均明显增加(P<0.05),模型组与假手术组相比差异不显著(P>0.05),第7d时治疗组与空白组相比显著增加(P<0.01)。SDF-1蛋白含量3d时可见显著增加,7d达到高峰,后逐渐下降,28d最低,仍高于其他组。  结论:(1)脑出血后大鼠NSCs开始增殖,治疗组增殖能力较强(P<0.05);(2)NSCs增殖,3d时开始,7d时达到峰值,后随着时间增加,28d接近正常,且治疗组较空白组增加显著(P<0.01);(3)丹参酮ⅡA可以有效提高大鼠脑出血后脑组织SDF-1蛋白含量;(4)丹参酮ⅡA具有增殖NSCs作用,可以改善受损神经功能。
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