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本文对14个蛹虫草Cordycepsmilitaris居群rDNA-ITS、nrLSU、MAT等基因序列进行测序,结合GenBank中相关类群,构建不同序列数据集矩阵,分析蛹虫草居群遗传结构,并重建蛹虫草及近缘种属系统发育关系。 本研究测序获得22条ITS序列,结合GenBank中蛹虫草ITS数据,共获得150条序列。序列分析显示,不同地理来源的蛹虫草ITS序列差异很小,而单孢子分离菌株的差异相对较大。 开展6基因(nrLSU、nrSSU、Tef-1α、Rpb1、Rpb2、β-tubulin)测序,对实验菌株分别进行单基因和多基因联合分析。结果表明,多基因联合分析较单基因序列分析显示出更多的遗传分化信息,并且有更好的分支支持率。多基因分析显示,昆明西山居群和嵩明大哨居群较其他居群遗传分化明显。整体而言,云南分布的蛹虫草居群间遗传分化较大,而东北分布的蛹虫草居群间遗传分化较小。 开展MAT基因测序(MAT1-1-1和MAT1-2-1),结合GenBank中相关类群分析其系统发育关系。结果表明MAT1-1-1基因在蛹虫草种内高度保守,而物种间差异明显;MAT1-2-1基因在蛹虫草居群间遗传分化明显,其中,昆明西山居群和嵩明大哨居群相对其他居群分化显著,聚类结果与6基因拓扑结构一致。 本研究还分析蛹虫草与其无性型的分类地位,探讨蛹虫草与近缘种属的系统发育关系。在GenBank中选择若干近缘物种,包括艳虫草菌科Cordycipitaceae大约80%的已报道物种,分别构建ITS和3~5基因(nrSSU,nrLSU,Tef-1α,Rpb1,Rpb2)聚类树。分析表明,ITS与3~5基因聚类树拓扑结构基本一致;蛹虫草在艳虫草菌科中隶属于虫草菌属(Cordycepss.s.),为单系分支,与近缘种无性型属白僵菌属Beauveria、棒束孢属Isaria和蚧霉属Lecanicillium等,都有一定的距离。研究表明,蛹虫草无性型不能简单的归属到拟青霉类群或轮枝孢菌类群中,蛹虫草无性型的系统发育关系有必要重新认识。