新型复合表面结构免疫传感器的构建及应用研究

来源 :南京师范大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:Jsan
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癌胚抗原(CEA)是临床常用的肿瘤标志物之一,目前临床使用的检测手段有所需时间长、操作复杂等缺点。电化学免疫传感器将电化学方法与免疫学结合,用于检测CEA,具有设备简单、分析速度快、线性范围宽、灵敏度高等优点,是目前分析检测领域的研究热点之一。本文以聚多巴胺(PDA)修饰的氧化铟锡导电玻璃(ITO)为基底,在电极表面分别引入功能化介孔二氧化硅(MSNs)、聚合物刷和超支化聚合物构建检测CEA的免疫传感器。主要的研究工作如下:1.基于功能化介孔二氧化硅纳米粒子的免疫传感器检测CEAITO电极表面修饰PDA涂层,利用戊二醛连接PDA与功能化MSNs,然后CEA抗体同样通过戊二醛被固定在功能化的MSNs上。在优化条件下检测CEA,线性范围为0.01-40.0 ng/mL,检测限为1.70pg/mL。临床血清样品的检测结果与参考值相比误差在可以接受范围内。这种免疫传感器具有灵敏度高和高效、经济的特点,在蛋白质诊断和生物活性物质检测方面存在应用前景。2.基于ATRP技术的免疫传感器检测CEA制备一种用聚(乙二醇)甲基丙烯酸酯(P(PEGMA))聚合物刷固定CEA抗体的电化学免疫传感器。P(PEGMA)聚合物刷与CEA抗体之间形成稳定的化学键,肿瘤标记物被共价连接到ITO电极表面。使用该免疫传感器在最优化条件下检测CEA,线性范围为0.05-20.0 ng/mL,检测限为1.09 pg/mL。使用该传感器检测实际样品并与酶联免疫分析法作比较,结果表明该传感器具有临床应用价值。3.基于超支化结构的免疫传感器检测CEA鉴于超支化聚合物的优点,制备了一种功能化端羟基超支化聚酯修饰的免疫传感器。ITO表面通过共价键接枝超支化聚酯,超支化聚酯与CEA抗体通过共价键相连,使肿瘤标志物能够较稳定的连接到电极表面。使用该免疫传感器在最优化条件下检测CEA,线性范围为0.01-80 ng/mL,检测限为2.36 pg/mL。该免疫传感器还显示较好的重复性、稳定性和选择性,且实际样品的检测结果与临床检测结果相近。
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