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双元细菌人工染色体(BIBAC)载体具有构建大片段DNA文库和转化植物的双重功能。利用BIBAC载体，在双子叶植物烟草和番茄中已实现了大片段DNA的转移，但在单子叶植物中的应用还未见报道。本研究利用不同水稻基因型、不同农杆菌菌株，对水稻进行了BIBAC2表达载体的转化研究。水稻成熟胚愈伤组织经过1-2次继代培养，在含乙酰丁香酮的N6培养上预培养3天，在包含BIBAC2载体的农杆菌菌液中侵染10min，26℃下共培养3天。感染后的愈伤组织在含25-50mg/L潮霉素培养基上经过4-8周的筛选，共得到了66株抗性再生植株。通过对抗性植株中GUS基因的组织化学染色检测，nptlI基因的PCR检测和ELISA检测，HYG基因的PCR检测，确认2株阳性植株来自EHA105菌系侵染的中花15号愈伤组织，1株阳性植株来自EHA105菌系侵染的中花8号愈伤组织，转化率分别为2.9﹪和0.9﹪。Southernblot杂交结果进一步表明，BIBAC2已被成功导入了水稻基因组，转化效果EHA105菌株优于C58C1菌株，中花15号、中花8号优于中花10号和中花11号。结果还表明，利用三亲交配法可以将大于23.5kb的载体转化到农杆菌中。初步建立了BIBAC2载体转化水稻的技术体系，为利用BIBAC系统对水稻进行大片段DNA转移和多基因转化，开展水稻分子设计育种奠定了基础。