溶胶凝胶法合成钛胶整体柱及在酚类和蛋白分离中的应用

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二氧化钛因其化学稳定性和对磷酸蛋白及磷酸肽的特异性吸附被认为是一种新兴的、很有应用前景的高效液相色谱基质。因此,结合二氧化钛良好的应用前景和整体色谱柱的优势,开发钛胶基质的整体色谱柱,并将能够快速、大批量分析,尤其在蛋白、多肽方向。本文研究了钛胶基质整体柱的合成以及钛胶整体柱在分离酚类物质,商品钛胶柱在乳清蛋白及其蛋白白酶水解产物中的应用。本课题的研究包括三个部分:(1)通过无需模板的溶胶凝胶法,以异丙氧基钛与经济便捷的冰乙酸、盐酸为原料,一步法直接合成出了具有大孔中孔双连续结构的钛胶整体柱。通过调节冰乙酸和水的量可以控制钛胶的形貌,经过350℃煅烧后得到了长度在13cm以上、大孔骨架尺寸为1μm、中孔孔径为5nm、BET比表面积63.4 m2/g、Langmuir比表面积118 m2/g的钛胶整体柱,作为高效液相色谱柱使用。(2)使用制得的钛胶整体柱对酚类标准品进行分析,并通过保留时间、热力学常数等数据评价钛胶整体柱的性能。(3)使用商品钛胶柱对乳清蛋白水解液进行分析。通过对不同磷酸盐缓冲液浓度,不同乙腈浓度的分析,得到最佳的液相色谱条件是:流动相为85%ACN,磷酸钠缓冲盐pH5.0,盐浓度为85% ACN条件下pH5.0磷酸钠盐的最大溶解度1.0mM。
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