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农药残留受到各国政府与消费者关注,其检测技术已受到越来越多的重视。因此,建立有效的农药残留检测方法,特别是灵敏、准确、快速、简便的检测方法,对保护生态环境、消费者健康具有重要意义。本研究以间接竞争免疫分析为基础,结合胶体金和寡核苷酸链信号放大技术,荧光标记寡核苷酸链探针提供检测信号,先后建立了针对三唑磷农药单残留和三唑磷、对硫磷、毒死蜱农药多残留检测的寡核苷酸信号放大免疫分析方法。主要内容如下:采用柠檬酸钠还原法,合成了粒径均一、形状规则、分散性良好、浓度约为9.9 nM的胶体金。将农药单克隆抗体和荧光标记的寡核苷酸链标记在胶体金表面,对标记过程的稳定剂浓度、老化时间、抗体浓度、寡核苷酸序列等条件进行优化,得到寡核苷酸荧光探针。利用间接竞争模式,建立了基于寡核苷酸信号放大的三唑磷农药荧光免疫分析方法,并对方法的分析条件如探针与半抗原的工作浓度、二硫苏糖醇（DTT）工作条件、甲醇浓度等进行了优化。方法在0.01–20μg L–1范围内线性关系良好,检出限为6 ng L–1。利用本方法进行了水、大米、黄瓜、甘蓝和苹果基质添加回收试验。方法的平均回收率为85.0%–110.3%,相对标准偏差为9.4%–17.4%。进一步将该方法与三唑磷的ELISA、LC-MS/MS分析方法进行了比较和确证。结果表明,该方法准确性好、灵敏度高,满足农产品中三唑磷农药残留分析要求,可用于实际样品检测。在三唑磷农药分析方法基础上,建立了基于寡核苷酸信号放大的三唑磷、对硫磷和毒死蜱农药多残留荧光免疫分析方法。在7种荧光标记物中筛选出3种荧光强度高、激发与发射波长交叉少的荧光物质作为寡核苷酸链标记物,即6-FAM、Cy3和Texas red,并研究了3种探针与3种包被半抗原之间的交叉反应,进一步优化了对硫磷、毒死蜱探针和半抗原的工作浓度。结果表明,3种探针与3种包被半抗原之间特异性良好,三唑磷、对硫磷和毒死蜱分别在0.01–20μg L–1、0.05–50μg L–1、0.5–1000μg L–1范围内线性关系良好,检出限分别为0.007μg L–1、0.009μg L–1、0.087μg L–1。在自来水、大米、小麦、黄瓜、甘蓝和苹果基质中进行了添加回收试验,并用LC-MS/MS确证。方法的平均回收率为77.7%–113.6%,相对标准偏差为7.1%–17.1%,与LC-MS/MS结果相近,表明该方法灵敏度高,准确可靠,能满足农产品中三唑磷、对硫磷和毒死蜱农药多残留分析要求,可为其它小分子化学污染物多残留分析提供借鉴。