HA117调控DPF3在法洛四联症发生中对心肌细胞分化作用机制的研究

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背景:法洛四联症是一种典型的先天性心脏畸形,其约占全部先天性心脏畸形的3%-5%,右心室流出道梗阻几乎可以见于全部的法洛四联症患者。近年来右心室流出道发育异常和心肌细胞分化异常与法洛四联症的关系被广泛报道,然而,同时包括大规模临床样本和体外实验的研究很罕见。HA117是一个新的抗分化长链非编码RNA(Long noncoding RNA,LncRNA),先前的研究表明HA117在体内和体外都与细胞分化密切相关。方法:为了探究HA117和法洛四联症的潜在关系,我们收集了84例行法洛四联症一期根治术患者的右心室流出道组织样本,我们检测了标本HA117表达量水平并且收集了术前基线水平、围术期数据、短期随访数据,用以完成涉及横断面和短期预后的研究。我们观察了HA117和其临近下游基因DPF3的表达量以及DPF3启动子区甲基化水平。在细胞实验中,我们利用5’-氮杂胞苷和全反式维甲酸诱导了间充质干细胞向心肌细胞分化,并对心肌细胞的标志物、细胞干性标志物和细胞行为学进行了检测。结果:McGoon比值、Nakata指数和左室末期舒张容积指数在HA117高表达组患者中降低,并且和HA117表达量呈负相关。HA117高表达组围手术期的住院天数和ICU时间都更长,患者术后6月动脉血气氧饱和度的提升在HA117高表达组相对较小。HA117高表达组DPF3启动子区甲基化水平升高。在细胞实验中,干扰HA117的表达可以使得心肌细胞标志物cTnT和Cx43表达升高,使得细胞干性标志物下调,同时可以促进细胞侵袭能力和迁移能力,降低增殖能力。结论:HA117是法洛四联症畸形严重程度的危险因素,是法洛四联症短期预后的风险因素,下调HA117可以促进干细胞向心肌样细胞分化,降低干细胞干性,并且影响细胞行为学。
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