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目的:抑郁症是一种高患病率、高复发率、高致残率、高自杀率的慢性神经精神疾病,经常伴焦虑、认知障碍等行为缺陷。大量研究证据提示氧化应激、炎症、海马区和抑郁之间存在相互作用。促炎细胞因子水平的升高与抑郁症状呈正相关,并且在抗抑郁药物治疗后显著降低。已有研究提示尾状核、前额叶皮层、海马区等脑区与抑郁密切相关,海马区一直是抑郁症研究的一个重要脑区。来自基础和临床研究发现,亚甲基蓝(Methylene blue,MB)具有显著的抗炎、抗氧化作用,能促进大脑皮质神经发生,并对包括双相情感障碍在内的各种脑部疾病发挥神经保护作用。但是,MB的潜在抗抑郁焦虑作用尚未得到充分研究。本论文通过构建脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)诱发的抑郁症小鼠模型,采用系统给药和核团给药两种方式治疗,旨在明确MB对炎症所致抑郁和焦虑样行为的作用,进一步明确其可能的作用机制。方法:1.将40只ICR小鼠随机分成生理盐水+生理盐水组(Sal+Sal)、生理盐水+LPS组(Sal+LPS)、MB(5mg/kg)+LPS组(MB5+LPS)、MB(20mg/kg)+LPS组(MB20+LPS)四组。LPS给药前和每次测试前30分钟按照Sal、Sal、MB(5mg/kg)、MB(20mg/kg)剂量分别腹膜腔注射相同体积的Sal和MB。腹膜腔注射LPS(800μg/kg)24小时后进行行为学测试,行为学测试主要包括:开场测试(open field test,OFT)、新颖抑制摄食测试(novelty suppressed feeding test,NSF)、糖水偏爱测试(sucrose preference test,SPT)和悬尾测试(tail suspension test,TST),每天进行一项。2.将40只ICR小鼠随机分成Sal+Sal、Sal+LPS、MB5+LPS、MB20+LPS四组。MB系统给药并适应两天后注射LPS(800μg/kg),24小时后进行新物体识别测试(novel object recognition task,NOR)。训练前30分钟MB系统给药,训练后1.5小时测试短时记忆,24小时测试长时记忆,测试前30分钟MB系统给药。测试结束后摘眼球取血,离心取血清。3.将40只ICR小鼠根据脑图谱通过脑立体定位仪进行手术在海马DG区埋置套管,恢复7天后随机分成三组:Sal+Sal、Sal+LPS和MB+LPS。LPS(800μg/kg)腹膜腔注射24小时后开始测试。测试前核团微注射MB(5μg/侧/0.4μL),给药2分钟,停针2分钟;第一次给药后0-5分钟进行OFT,随即进行TST,间隔6小时后再次MB核团给药并进行FST。4.酶联免疫吸附剂测定(ELISA):两种模型末次行为学测试结束后摘眼球取血,离心取血清;然后按照ELISA试剂盒说明书进行血清血红素加氧酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)的含量检测。结果:1.小鼠体重曲线显示MB系统给药对LPS小鼠的体重下降没有影响(P>0.05)。2.在NSF中,摄食潜伏期和摄食总量均无组间差异(P>0.05,P>0.05),在OFT测试中,活动总距离也没有组间差异(P>0.05)。3.在FST中,两种剂量的MB系统给药均能够显著逆转LPS诱发的总不动时间延长(P<0.01,P<0.01)和不动前潜伏期缩短(P<0.01,P<0.05);在TST测试中,两种剂量的MB系统给药均能够显著逆转LPS诱发的总不动时间延长(P<0.005,P<0.01),对不动潜伏期没有影响;在SPT测试中,两种剂量的MB系统给药均能显著逆转LPS诱导的糖水偏爱值下降(P<0.05,P<0.01),对摄取总量没有影响。4.在NOR中,两种剂量的MB系统给药均能够显著逆转LPS诱发的小鼠长时记忆损伤(P<0.05,P<0.01)。5.ELISA结果显示,两种剂量的MB系统给药均能够显著逆转LPS诱发的小鼠外周血清HO-1水平下降(P<0.01,P<0.01)。6.在OFT中,MB核团给药能够显著逆转LPS诱发的中央停留时间下降(P<0.01)和活动总距离减少(P<0.01)。7.在FST中,MB核团给药能够显著逆转LPS诱发的总不动时间延长(P<0.01)和不动前潜伏期缩短(P<0.01);在TST中,MB核团给药能够显著逆转LPS诱发的总不动时间延长(P<0.05)和不动潜伏期缩短(P<0.01)。结论:1.亚甲基蓝系具有显著的抗抑郁和抗焦虑活性。2.亚甲基蓝神经调节效应可能与其对血清HO-1的调节有关。3.海马DG区可能是亚甲基蓝发挥抗抑郁作用的目标脑区。