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本文建立了检测大豆黄酮(Da)的酶联免疫吸附分析方法(ELISA)，并利用该方法检测了大鼠血清、鸡蛋以及大鼠饲料和鸡饲料中的大豆黄酮，比较了大鼠的日采食量、增重和血清与饲料中大豆黄酮的含量的变化趋势。同时探讨了β-葡萄糖甙酸酶与酶制剂分别对鸡蛋与饲料中的Da释放的影响。 1．检测大豆黄酮的酶联免疫吸附分析方法(ELISA)的建立 用混合酸酐法，将大豆黄酮分别与载体蛋白鸡卵白蛋白(OA)和牛血清白蛋白(BSA)偶联。 用偶联物OA-Da免疫新西兰大白兔，制备了免抗大豆黄酮的多克隆抗体。以BSA-Da作检测抗原，琼脂扩散实验效价最高是1：16。用ELISA方法，检测了兔抗大豆黄酮的抗体，效价最高是1：7000。 建立了检测Da的竞争抑制性ELISA方法。大豆黄酮的类似物7-羟基异黄酮和染料木素与Da的免疫交叉率分别是15％和10％。包被抗原为BSA-Da，一抗为抗Da多克隆抗体，二抗为辣根过氧化物酶标记的羊抗兔IgC(HRP-IgG)，底物为邻苯二胺(OPD)。包被抗原及抗体工作浓度均由方阵实验确定。标准曲线在0.10-4.00μg／ml的范围内所测的吸光度值与Da标准品浓度的对数表现出负相关，相关系数R~2=0.98，回归方程为LogitY=-1.26IgC+4.37。孔间误差1.3％(n=8)，板间误差4.3％(n=4)。稳定性较好，变异系数为0.70％(n=8)。检测灵敏度是0.10μg／ml，线性检测范围是0.10-4.00μg／ml。 2．饲料中添加酶制剂(CBP)与大豆黄酮对大鼠生产性能的影响及用ELISA检测血清和饲料中大豆黄酮的含量 48只断奶SD大鼠，雌雄各半，分别饲养。雌雄分别分为4组：饲喂基础日粮组(对照组)，饲喂基础日粮+Da3mg／kg(Da组)，饲喂基础日粮+0.01％的酶制剂组(E组)，饲喂基础日粮+Da3mg／kg+0.01％的酶制剂组(Da+E组)。试验期持续5周。与对照组相比，雌性大鼠，Da组，日增重显著性提高34.45％(P＜0.01)，料重比下降2 大豆黄酮酶联兔疫吸附分析方法的建）及儿在大鼠血清、鸡蛋与饲料中含量的辟测17．45％，血清中h 提高 16．53％；E fR，增重提高 25．500，料重t匕T降 6．83％，血清中加 提高 32．00％；Da十E组，增重提高 31．79％，料重t匕下降 10．61％，血清中他 提高57．60％（P＜0．01）；雄性大鼠，Da组，增重提高15．32％，料重比下降6．33％；E组，增重提高＊．97％，料重比与对照组相似；Da死组，增重提高 7．53％，料重比下降 6．59％；血清中Da的含量与对照组相比，实验组显著性增高（P＜0．们人 用p－葡萄糖戒酸酶预处理饲料提取Da。饲料中 Da的含量，与对照组相比，Da组提高23．06％，E组提高104．93％Dao组提高140．22％。 各实验组生产性能的增长趋势与血清和饲料中 Da的含量的提高一致。p－葡萄糖武酸酶与酶制剂在一定程度上促进日粮中 Da的释放与机体的吸收3．不同的提取方法提取鸡蛋中的大豆黄酮及用ELISA检测其含量 产蛋高峰期依莎蛋鸡20只，分为对照组与实验组，对照组饲喂基础日粮，实验组饲喂基础日粮巾a 6mg八g。从连续三天收集的鸡蛋中随机选取部分鸡蛋用三种方法提取，用 ELISA方法检测鸡蛋中 Da的含量，结果表明，蛋黄比蛋清含量高，用卜葡萄糖武酸酶预处理鸡蛋提取的 Da的效果比较好。与对照组相比，实验组鸡蛋中 Da含量提高5．49％。