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目的:以往大量的研究表明组蛋白去甲基化酶KDM3A参与了糖尿病高血糖相关的多种心血管并发症,然而,尚不清楚KDM3A是否参与了高胰岛素所引起的心血管损伤的病理生理过程。因此本次研究的目的是探究下调组蛋白去甲基化酶KDM3A的表达是否可以缓解高胰岛素诱导的血管平滑肌细胞功能紊乱并进一步探讨其潜在的机制。方法:从SD大鼠胸主动脉中分离原代血管平滑肌细胞。用含有control-siRNA或KDM3A-siRNA的慢病毒载体转染血管平滑肌细胞72小时,然后在含有浓度为100nm的胰岛素的培养基中培养5天。采用CCK-8法检测血管平滑肌细胞的增殖,transwell小室检测血管平滑肌细胞的迁移,流式细胞学检测测定血管平滑肌细胞的凋亡,DHE荧光探针检测细胞内活性氧簇(ROS)的水平。使用qRT-PCR检测细胞内白介素-6(IL-6)和单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)mRNA的表达,此外,采用 western-blot 检测 KDM3A、MAPKs、NF-κB/p65、Bax 和 Bcl-2 的蛋白表达水平。结果:100nm的胰岛素可以显著促进血管平滑肌细胞的增殖、迁移、凋亡及ROS的生成,并显著上调细胞中1L-6和MCP-1 mRNA的表达。当平滑肌细胞转染含有KDM3A-siRNA的慢病毒后可以显著逆转由高胰岛素诱导的平滑肌细胞中KDM3A表达的升高,同时,抑制KDM3A的表达可以大大缓解高胰岛素诱导的平滑肌细胞的增殖和迁移,并减少细胞内ROS的产生,减少细胞的凋亡以及炎症因子的表达,更为重要的是,下调KDM3A基因的表达可以缓解高胰岛素导致的MAPK家族蛋白的磷酸化水平和NF-κB/p65表达的上调。结论:高浓度的胰岛素可以对血管平滑肌细胞造成损伤并导致其生理功能紊乱,而下调KDM3A基因的表达可以对高胰岛素培养的平滑肌细胞发挥多重保护作用,其潜在的可能机制是抑制MAPKs/NF-κB信号通路的激活。