乌头类药物在我国已有2000多年的使用历史,功效显著,疗效确切。但是乌头类含有毒性强烈的乌头碱化学成分,临床上中毒现象长期以来一直严重影响着临床用药的安全和疗效。中药乌头的有效成分即毒性成分,治疗量、中毒量和致死量非常接近,其在临床实践中的毒副反应多年来不断见诸报端。乌头碱的主要毒性靶器官为心血管系统和中枢神经系。其心脏毒性有多种表现形式,常表现为窦性心动过缓(窦缓)、窦性停搏或房室传导阻滞(AVB),严重者可出现室性心律失常,甚至心室纤颤(室颤)而致死。乌头碱的致心律失常毒性作用可能是由于兴奋了心脏的迷走神经,使节后纤维释放大量乙酰胆碱,从而使窦房结的自律性和传导性降低,而心肌各部分兴奋的结果,使传导和不应期不一致,复极不同步而易形成折返,从而发生严重室性心律失常。然而,这些研究仅限于临床观察和药效学方面的研究,对其毒性的报道也主要集中在急性毒性方面,对阐明毒性作用的分子机制研究较少,很难解释乌头类药物产生治疗和中毒作用的机理。因此,本试验旨在利用标准玻璃微电极技术在多细胞标本上观察乌头碱在生理情况下对豚鼠乳头肌、窦房结的动作电位的影响,为揭示乌头碱的治疗和中毒作用机制提供实验依据。　　 一乌头碱对豚鼠乳头肌动作电位的影响及作用机制研究　　 目的:观察乌头碱对豚鼠乳头肌动作电位的影响并分析其可能的作用机制。　　 方法:(1)用标准玻璃微电极技术记录豚鼠乳头肌的动作电位,在1Hz的刺激频率下分别加入AC3×10-8、1×10-7及3×10-7mol/L,观察给药前及给药20min时Aps的变化。(2)观察在给AC(1×10-7mol/L)前、20min后不同刺激频率下(0.3Hz,1Hz,3Hz)动作电位各参数:振幅(APA)、静息电位(RP)、超射幅度(OS)、复极10％的动作电位时程(APD10)、复极20％的动作电位时程(APD20)、复极30％的动作电位时程(APD30),复极50％的动作电位时程(APD50)、复极90％的动作电位时程(APD90)、O相最大除极化速度(Vmax)、最大复极化速度(VmaxV)、平均复极化斜率(VaveV)　　 结果:(1)在1.0Hz刺激频率下,AC3×10-8和1×10-7mol/L内对APA、RP、OS、APD10、APD20、APD30、APD50、APD90、Vmax、VmaxV和VaveV无明显影响,当AC浓度增加至3×10-7mol/L时,灌流不久就出现自发性节律,截取第20min时的一个代表性图像发现,APA和OS分别降低了27％和62％,APD10、APD20、APD30、APD50和APD90则分别缩短21％、80％、51％、69％和23％,而APD90-30明显延长28％。(2)豚鼠乳头肌在0.3Hz、1Hz和3Hz刺激频率下给AC(1×10-7mol/L)后APD90分别缩短4％、5％和6％,平行对照的APD90分别缩短3％、4％和5％,两者相比,在低、中、高三个刺激频率下较同时间平行对照无显著性差异(P＞0.05)。APA、RP、OS、APD10、APD20、APD50、Vmax、VmaxV、VaveV与APD90结果一致。　　 结论:AC低浓度(3×10-8、1×10-7)对豚鼠乳头肌动作电位未见明显影响,增大浓度可出现自发性节律。　　 二乌头碱对豚鼠窦房结动作电位的影响及作用机制研究　　 目的:观察乌头碱对豚鼠窦房结动作电位的影响并分析可能的作用机制。　　 方法:1用标准玻璃微电极技术记录豚鼠窦房结的动作电位,观察在给AC(3×10-8mol/L、1×10-7 mol/L及3×10-7 mol/L)前和10min后动作电位各参数变化,这些参数包括:舒张期自动去极化平均速度(VDD)、起搏细胞放电频率(RPF)、最大舒张电位(MDP)、去极化最大速度(Vmax)、动作电位幅度(APA)、动作电位复极化50％时间(APD50)、动作电位复极化80％时间(APD80)、动作电位复极化90％时间(APD90)。　　 2用T型Ca2+通道阻断剂NiCl2(5×10-2mol/L)阻断Ica-T后,观察AC(1×10-7mol/L)对动作电位各参数的影响。　　 3用L型钙通道阻断剂Nimo(3×10-7 mol/L)阻断Ica-L后,观察AC(1×10-7mol/L)对动作电位各参数的影响。　　 4用Na+/K+-ATP酶抑制剂NaVO3(1×10-3mol/L)后,观察AC(1×10-7mol/L)对动作电位各参数的影响。　　 5用E-4031(1×10-6mol/L)阻断延迟整流钾电流Ikr后,观察AC(1×10-7mol/L)对动作电位各参数的影响。　　 6用CsCl(1×10-3 mol/L)阻断If电流后,观察AC(1×10-7mol/L)对动作电位各参数的影响。　　 结果:(1)AC3×10-8mol/L的时候,窦房结动作电位未见明显改变;1×10-7mol/L则使动作电位出现的频率加快;随着剂量增加,作用更为明显;至3×10-7mol/L时,开始出现迟后除极,并伴有触发活动。计算动作电位各参数显示,与给药前比较,AC1×10-7 mol/L可使VDD增加22％,RPF增加37％,APA降低5％,APD50缩短11％,APD80缩短8％,APD90缩短6％(P＜0.05)。其它参数包括MDP和Vmax未见明显变化。(2)加入NiCl2(5×10-2mol/L)的基础上再加AC(1×10-7mol/L)时,NiCl2+AC组APA下降更为明显,可下降32％,而APD80和APD90则分别增加了26％和28％。(3)加入Nimo(3×10-7mol/L)的基础上再加AC(1×10-7mol/L)时,Nimo+AC组AP各参数的变化与control组比较没有显著差别。(4)加入NaVO3(1×10-3mol/L)的基础上再加AC(1×10-7mol/L),NaVO3+AC组VDD、RPF及APA分别缩短了46％、32％和16％。(5)加入E-4031(1×10-6mol/L)的基础上再加AC(1×10-7mol/L)时,APD50、APD80和APD90分别延长了24％、36％、41％。(6)加入CsCl(1×10-3mol/L)的基础上再加AC(1×10-7mol/L)时,APD50、APD80和APD90分别可延长24％、16％和17％。　　 结论:AC(1×10-7mol/L)可以提高窦房结自律性,增大浓度则会出现迟后除极和触发活动。AC对窦房结自律性的增加作用可能与激活Ica-T和Ica-L、激活钠钾泵和增强,Ikr和If有关。