具备乙醇转化能力的阴沟肠杆菌新菌株AFB4-4的选育

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木糖是木质纤维素水解产物中含量仅次于葡萄糖的一种单糖,它的有效利用是木质纤维素物质转化生产乙醇的关键环节之一。因此,筛选有效利用木糖转化生产乙醇的菌种对于推动整个纤维素燃料乙醇制备技术的发展具有重要意义。为了获得高效转化木糖生产乙醇的菌种,本研究进行了菌种筛选、鉴定和发酵条件优化的研究工作,主要研究结果如下:1.以木糖为唯一碳源,通过从玉米地、牛粪堆积地、自制堆肥和落叶腐烂处土壤等广泛取样,利用TTC平板法初步筛选出了5株具有较强木糖发酵能力的菌株,并通过进一步摇瓶筛选,获得了一株利用木糖生产乙醇能力较好的菌株,命名为AFB4-4。2.通过菌株的形态观察、生理生化特性分析和16S rDNA鉴定,确定菌株AFB4-4为阴沟肠杆菌(Enterobacter cloacae)。该菌能广泛利用各种碳源,可发酵木糖、葡萄糖等多种糖。3.通过发酵试验考察供氧条件、温度、初始pH、接种量和发酵时间对乙醇产量的影响,优化发酵条件,得出菌株AFB4-4发酵木糖的最适条件为:温度35℃,初始pH7,接种量6×107个/mL,发酵48h。在此条件下,进行了菌株AFB4-4发酵单糖和混合糖对比试验,发酵20g/L木糖产乙醇4.95g/L,乙醇得率为理论值的53.8%,发酵20g/L葡萄糖产乙醇2.44g/L,乙醇得率为理论值的23.9%,该菌利用木糖转化乙醇的能力优于葡萄糖。20g/L木糖与10g/L葡萄糖共发酵时,乙醇的产量可达6.28g/L,表明菌株AFB4-4是能同时发酵木糖和葡萄糖生产乙醇的天然菌株。
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