Radixin表达下调对SGc-7901细胞中MRP2表达及外排功能的影响

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药物转运体,作为一种特殊的膜蛋白家族,在药物的吸收,分布与清除中发挥了重要的作用,药物转运体在肿瘤细胞中的过量表达所引起的多药耐药更是肿瘤治疗失败的主要原因。因此,了解药物转运体蛋白表达功能的分子调控机制对药代动力学研究及肿瘤临床治疗具有积极作用。MRP蛋白家族是药物转运体家族的亚家族。MRP2是MRP蛋白家族的第二个成员,主要介导有机阴离子的主动转运。有报道已证实ERM(ezrin/radixin/moesin)蛋白家族中的radixin参与了MRP2在肝细胞微管膜上定位的调控。然而有关两者关系的报道主要集中在radixin对MRP2定位的调控上,鲜有关注到radixin对MRP2表达及功能的影响;并且大部分的研究都是在以肝细胞为代表的仅有radixin单独表达的体系中进行,甚少在ERM三个蛋白都存在的体系中。  为了检验radixin在MRP2及MRP家族其他成员的表达及功能上的作用,ERM三个蛋白均表达的人胃癌SGC-7901细胞被选择作为模型。本研究通过RNAi方法构建radixin表达下调的稳定细胞株,运用RT-PCR方法检测了MRP1-6成员mRNA表达水平;实时荧光PCR和western结果表明radixin的表达下调使MRP2在mRNA和蛋白水平上的表达都下调了大约50%,并由此影响了SGC-7901中calcein的外排;MTT实验结果表明radixin表达下调稳定细胞克隆中calcein外排效率的降低并非由各细胞株活力的差异所导致。综上,在ERM三个蛋白共表达的体系中,radixin特异性调控MRP2的表达和功能。
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