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循环肿瘤细胞(CTC)检测计数对于肿瘤早期筛查、癌症进展、预后判断等具有重要意义,目前已经受到研究者广泛关注。基于免疫磁珠分离的CTC分离的方法目前发展较为成熟,通常结合免疫荧光染色方法进行CTC鉴定和计数。本论文针对这个技术路线中,CTC分离和检测计数的速度慢、无统一鉴定标准问题,利用微流控芯片技术和深度卷积神经网络开展研究工作,并开发了自动化CTC分离装置。 本论文首先开发了用于CTC检测的微流控芯片。芯片上集成了样品过滤、CTC分离和单细胞定位模块,并针对芯片专门定制研发了图像分析软件,可自动化实现从进样到CTC计数的全过程。经过测试和优化,该芯片系统对CTC的处理速度和分析效果均优于人工方法,为CTC快速检测提供了新方法。 本研究也研究了不依赖于芯片微结构的普适性CTC图像识别方法,即基于深度卷积神经网络的自动识别方法。该方法采用有监督学习方式,图像经预处理后,再由人工识别分类,然后对网络进行训练。经测试,网络识别CTC效果已经优于人工水平,且加大正样本后仍有提升空间,为生物图像自动化分析提供了新思路。 在普适性CTC图像识别方法的基础上,本研究继续改进了CTC检测的手工方法,得到了自动化CTC磁分选装置。该装置采用强磁场在细小的管路中进行CTC分离,改善了手工检测因磁场强度不足带来的捕获时间长,分离效率不佳的问题。装置还可以与前面开发的基于深度学习网络的CTC图像分析方法结合,实现CTC检测全过程的高效和自动化,有助于促进CTC检测应用的广泛推广。