目的1．通过文献查询干红葡萄酒中具有鉴别意义的特征性物质；2．建立干红葡萄酒特征性物质的UPLC-MSn的检测方法；3．建立干红葡萄酒特征性物质的提取净化方法,并比较不同提取净化方法的回收率，以选择最优的方法；4．分别对各类发酵酒（包括啤酒、干红葡萄酒和白酒）及饮料进行检测，确认所选特征性物质能用来鉴别各种酒类及饮料，为饮酒后导致的各类案件的检材采取、检测、结果分析及法医学鉴定提供科学依据；5．研究饮酒后，通过对生物检材(包括唾液、尿液和血液)中特征性物质的检测，推断是否饮用过干红葡萄酒。方法1.通过文献查新了解各种发酵酒中微量物质的差异以及干红葡萄酒的特征性物质，本文选定其特征性物质为奎宁酸和白藜芦醇；2．对检材预处理后，采用Waters Oasia@MAX 3cc (200mg)固相萃取小柱对检材进行提取净化，采用Acquity UPLC @BEH C18 1.7μm柱做为液相色谱柱，电喷雾电离负离子（ESI-）对检材进行UPLC-MSn检测。3．选取常见干红葡萄酒、白酒、啤酒及饮料做为检材，通过对检材提取净化处理后，检测其奎宁酸和白藜芦醇的含量。4．人体饮用各种发酵酒后，通过对人体生物检材（血液、尿液、唾液）中干红葡萄酒的特征性物质的检测，甄别是否饮用过干红葡萄酒。结果1.分别以空白血中奎宁酸和白藜芦醇的浓度为横坐标，其峰面积为纵坐标作图。测得奎宁酸的典型工作曲线回归方程为：y=100X-2.5167，γ=0.9999，n=6，线性范围为1.25μg/ml-20.0μg/ml，最低检出限为1.01μg/ml。白藜芦醇的典型工作曲线回归方程为：y=400.19X-45.579，γ=0.9998，n=6，线性范围为1.25μg/ml -20.0μg/ml，最低检出限为0.83μg/ml2.本文所建立的方法，适用于血液、唾液和尿液检材。3.通过对常见干红葡萄酒、白酒、啤酒及饮料的检测，测得干红葡萄酒中均含有奎宁酸和白藜芦醇，而白酒和啤酒中未检测到二者的存在。饮料中美之源中检测到白藜芦醇，未检测到奎宁酸。统一葡萄多中二者均未检测到。4.人饮用干红葡萄酒后，其检材血液、唾液、尿液中均未检测到奎宁酸和白藜芦醇。结论1.采用Acquity UPLC @BEH C18 1.7μm的色谱柱，发现奎宁酸和白藜芦醇出峰峰形对称性良好，出峰效果比HILIC柱好，因此本文所建方法采用Acquity UPLC @BEH C181.7μm的色谱柱。UPLC-MSn条件优化后建立的方法，检测结果准确、灵敏、重现性好等特点，能达到定性定量分析的要求。2．本实验采用MAX柱和C18柱分别做为固相萃取小柱，平行操作，发现MAX柱比C18柱回收率高，重现性好。因此本文采用MAX柱为固相萃取小柱对检材进行提取净化。采用固相萃取对样品提取净化时不需要衍生化处理，方法建立后适用于生物检材的快速检测。3．本实验采用固相萃取技术对检材进行提取净化后对奎宁酸和白藜芦醇回收率高，尤其对于要求检材干净、杂质少的UPLC-MSn方法更为适用。结合LTQ XL线性离子阱质谱的高灵敏度特性，可以检测出检材中的微量特征性物质。4．不同种类葡萄酒中含有不同量的奎宁酸和白藜芦醇，但是本文所检测的红星二锅头、蓝带啤酒中却未检测到二者，这说明本文所建立的方法可应用于发酵中中红酒、白酒及啤酒的鉴别区分。5．不同产地、不同品种的葡萄酿制的葡萄酒中奎宁酸和白藜芦醇的含量不同。6．统一葡萄多中含有葡萄汁，但是却检测不到奎宁酸和白藜芦醇，可能是由于饮料中的其他添加剂影响了奎宁酸和白藜芦醇的存在形式。7．本实验志愿者饮用干红葡萄酒后，检材血液、尿液、唾液中均未检测出奎宁酸和白藜芦醇。其原因有可能是酒中奎宁酸和白藜芦醇含量少，而且饮酒量少，所以进入人体后检材中二者含量小于仪器可检测的最小浓度；或者可能是由于奎宁酸和白藜芦醇进入人体后迅速溶于血液且转化为代谢物而导致仪器检测不到。