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核桃属植物不易诱导不定根,因此在良种无性繁育中存在一定困难。在成功解决核桃成龄试管不定根诱导问题之后,针对不定根发生的调空机制开展研究,并在生根组织学、激素调控及免疫组织化学等方面取得以下结果:1、以新早丰核桃品种为试材,在试管中采用二步生根法诱导不定根发生,通过解剖学观察发现:(1)核桃试管嫩茎中未发现潜生根源基。(2)不定根原基起源于形成层,特别是髓射线正对的形成层部分,说明核桃不定根发生属诱生根原基型,并且单位点发生。(3)不定根伸长后,其伸出的侧根产生于中柱鞘细胞。(4)不定根的发育过程可分为4个阶段:①形成层细胞分化;②转变为分生组织细胞群(即根原始细胞);③这些细胞群不断分裂和分化,发育成可见的根原基;④根原基内细胞继续分裂分化形成一个根尖的外形,其内发育出维管束,并向外生长,穿过皮层,突破茎表皮。(5)在组织培养条件下长出的不定根内部解剖构造为典型的初生构造,移栽后68d出现次生构造。(6)试管苗根毛出现与否和发育状况,受基质的理化性质的影响,即生态条件可以改变组织发生及其形状。2、以晋龙1号核桃品种种实子叶为试材,在1/4DKW培养基上诱导生根,观察生根过程中的组织结构变化,结果如下:核桃子叶近胚端、中部和远胚端,经IBA处理后,均能生根;经6-BA处理后,均不能生根。从激素角度,再次印证了,外源生长素可以诱导和促进产生不定根,6-BA抑制不定根的发生。从解剖学角度,试验观察发现,子叶经IBA处理在维管束周围和子叶边缘产生分省组织,而经6-BA处理的没有分生组织产生,这些分生组织即为根的形态发生区域。总的来讲,子叶不定根的发生分为三个阶段:分生组织形成期、根原基形成期和不定根发生期。3、以晋龙1号核桃品种种实子叶为试材,在1/4DKW培养基上诱导生根,通过免疫定位观察生根过程中IAA变化,结果如下:整个核桃子叶中均有IAA的分布,但主要集中分布在未成熟的网状维管组织中,维管发育完善后,主要集中在维管束周围的分生组织中。并且,近胚端IAA信号最强,由近胚端到远胚端IAA信号逐渐减弱。在子叶生根过程中IAA的运动路线是:未成熟的维管组织→成熟维管组织周围的环形分生组织→根原基→中柱鞘→根尖生长点。