以野牛草成熟胚为外植体材料,对外植体的灭菌、愈伤组织的诱导、继代及植株再生等各个培养阶段的影响因素进行了探讨;并从不同角度对愈伤组织的褐化诱因进行了研究。结果表明: （1） 用70%酒精对外植体处理60s后,用70%NaClO原溶液（有效氯为7～10%）灭菌25～30min,效果最佳,污染率最低降至0.59%,且对外植体损伤不大。 （2） 采用MS为基本培养基,添加2,4-D浓度为2.0～3.0mg/L,6-BA浓度为0.1mg/L时最高诱导率达86.67%。5～10mg/L的STS、AgNO₃有利于改善诱导愈伤组织的质量。 （3） 愈伤组织的褐化受酚类物质氧化、继代周期及营养条件等多种因素影响。抗氧化剂PVP及Vc浓度为200mg/L时,可延迟愈伤组织褐化时间;缩短继代周期至5d可有效防止愈伤组织褐化;外源多胺能影响内源多胺与乙烯的合成,并可减轻愈伤组织的褐化,改善愈伤组织质量;MS大量元素减至3/4,附加2,4-D 2.0mg/L及6-BA0.1mg/L愈伤组织生长速度较快,而对防止愈伤组织褐化作用不明显。 （4） 胚性愈伤组织的诱导培养基为MS+2,4-D 0.5mg/L+6-BA0.1mg/L。再生培养基为不加任何植物生长调节剂的MS基本培养基（记为MS₀）。愈伤组织干燥处理48h有利于胚性愈伤组织的诱导,与对照相比,诱导率提高9.97%。 （5） 添加STS诱导培养基中获得的愈伤组织,植株再生率最高,为36.2%。