黑老虎花色苷和乌饭树叶黑色素环糊精包合物研究

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黑老虎(Kadsura coccinea(Lem.) A. C. Smith)是木兰科五味子属的藤本植物,黑老虎果皮中含有大量花色苷、多酚、黄酮以及微量元素,具有多种生物活性。为了增加黑老虎花色苷提取物稳定性和抗氧化活性,选取β-环糊精和它的衍生物2-羟丙基-β-环糊精包合花色苷提取物。此研究采用1%盐酸乙醇浸提、AB-8大孔树脂制备黑老虎花色苷提取物,分别采用pH示差法、福林-肖卡尔法和NaNO2-Al(NO3)3法测定提取物中花色苷、多酚以及黄酮含量。应用紫外-可见光谱、红外光谱和扫描电镜对包合物表征鉴定,并且对两种环糊精包合物中总花色苷、多酚、黄酮包合率进行测定。运用热重分析法比较包合前后黑老虎花色苷提取物热稳定性变化,通过 DPPH、ABTS自由基清除实验和Fe2+还原能力评价所有样品的体外抗氧化活性,KBrO3诱导小鼠的氧化应激肾损伤模型,评价黑老虎花色苷提取物和两种包合物体内抗氧化活性。  黑老虎花色苷提取物中花色苷、多酚以及黄酮含量为40.95±0.115 mg/g、107.75±2.482 mg/g、185.57±0.883 mg/g。形态学和光谱研究表明包合物已形成,并且两种环糊精包合物中总花色苷、多酚、黄酮包合率均在80%以上。由热重分析实验,可知黑老虎提取物在室温到360℃范围内,呈近似线性降解,而环糊精包合物从室温到300℃降解速率较慢,说明环糊精包合,可显著提高花色苷提取物的稳定性。其中2-羟丙基-β-环糊精包合物(314℃时,重量损失为32.66%)相对β-环糊精包合物(290℃时,重量损失为34.01%)更加稳定。体外抗氧化实验结果显示,环糊精包合可以增强黑老虎花色苷提取物的抗氧化活性,抗氧化活性次序:黑老虎花色苷提取物<β-环糊精包合物<2-羟丙基-β-环糊精包合物,其中,β-环糊精和2-羟丙基-β-环糊精本身无抗氧化活性。对KBrO3诱导的氧化应激性肾损伤小鼠,给予黑老虎花色苷提取物、β-环糊精包合物和2-羟丙基-β-环糊精包合物(100 mg/kg),同等剂量条件下,对肾损伤小鼠的保护作用次序:花色苷提取物<β-环糊精包合物<2-羟丙基-β-环糊精包合物。  乌饭树(Vaccinium bracteatum Thunb.)是杜鹃花科越桔属植物,乌饭树叶黑色素含有多种化学成分,如花色苷类、黄酮类等,且着色能力强,但易受金属离子、防腐剂影响而发生变色或褪色。本文主要考察不同提取方式对乌饭树鲜、干叶的黑色素提取物化学成分和抗氧化活性影响,环糊精包合乌饭树叶黑色素前后的抗氧化活性和稳定性的变化。对乌饭树鲜叶与干叶,分别采取水或乙醇,冷浸或回流制备提取物;紫外分光光度法测定各提取物的总黄酮含量,两种抗氧化指标比较八种不同提取物的抗氧化活性,得出乌饭树叶黑色素最佳提取的方式。β-环糊精和2-羟丙基-β-环糊精制备乌饭树叶黑色素包合物,热重分析法比较提取物与其包合物热稳定性差异,Fe3+和山梨酸钾对乌饭树黑色素提取物及其包合物吸光度的影响,并比较包合前后抗氧化活性的变化。结果表明,鲜叶乙醇回流提取物的总黄酮含量最高(19.48%),鲜叶水回流提取物的抗氧化活性最强。环糊精包合后可提高乌饭树叶黑色素的抗氧化活性,尤其是2-羟丙基-β-环糊精包合物。热重分析结果表明,环糊精包合后扩大了乌饭树叶黑色素提取物热稳定适应范围。添加Fe3+或山梨酸钾后,环糊精包合物与黑色素提取物吸光度均增大。包合后乌饭树黑色素对 Fe3+离子和防腐剂的稳定性没有提高,但在添加Fe3+情况下,包合物比色素本身着色力提高。
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