【摘 要】
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从柽柳(Tamarix hispida)根中的cDNA库中分离出一个与盐相关的类锌指基因(ThZFL)。ThZFL基因全长514bp,开放读码框自103位的ATG起,止于421位的TAA,为318bp,共编码105个氨基酸
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从柽柳(Tamarix hispida)根中的cDNA库中分离出一个与盐相关的类锌指基因(ThZFL)。ThZFL基因全长514bp,开放读码框自103位的ATG起,止于421位的TAA,为318bp,共编码105个氨基酸,推测其分子量为11.25kD,等电点为9.97。对其进行生物学信息分析,这个基因与动物锌指蛋白有部分相似性。Northern blot分析表明盐和渗透剂处理都提高了ThZFL在柽柳根部的表达,也能被ABA诱导。亚细胞定位表明ThZFL蛋白是定位在细胞壁中的蛋白。将ThZFL基因克隆到酵母表达载体pYES2中,转化酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)中,空载体pYES2转酵母为对照。分别用NaCl和甘露醇胁迫处理转ThZFL与对照酵母,表明ThZFL基因对盐和渗透有抵抗能力。为进一步研究ThZFL的功能,用农杆菌介导法将ThZFL基因转入烟草中,以GUS基因作为对照,得到了转基因烟草。PCR、Southern杂交和Northern杂交检测表明ThZFL和GUS基因分别整合到烟草基因组中,并能够表达。选取3个转ThZFL基因株系的种子及叶片进行了非生物胁迫实验,转GUS基因及非转基因烟草作为对照。分析逆境胁迫条件下非转基因、转GUS基因植株和转ThZFL基因植株种子发芽率、相对生长量及丙二醛(MDA)含量。结果显示,胁迫条件下,转ThZFL基因的发芽率、相对生长量明显高于对照,丙二醛含量低于对照。这些结果表明ThZFL的过表达提高了转基因植株的抗盐和耐渗透能力。
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