论文部分内容阅读
目的：建立CD137单抗联合IL-15体外扩增NK细胞的方案，研究扩增后NK细胞对肺癌细胞的杀伤活性。方法：分离健康人外周血单个核细胞，经免疫磁珠（miniMACS）阴性分选获取CD3-CD56+NK细胞，将NK细胞分成对照组、IL-2+CD137单抗联合IL-15组、IL-2+CD137单抗组、IL-2+IL-15组、IL-2组进行培养，每3d半量更换条件培养基。经锥虫蓝染色法计算NK细胞的扩增倍数；流式细胞术检测NK细胞的表型；LDH酶释放法检测NK细胞对肺癌细胞株A549的杀伤活性；ELISA法检测扩增后NK细胞培养液上清中IFN-γ的分泌量。结果：经免疫磁珠阴性分选后NK细胞纯度为（93.28±3.21）%。IL-2+CD137单抗联合IL-15组NK细胞扩增倍数明显高于IL-2+CD137单抗组、IL-2+IL-15组、IL-2组及对照组[(86.20±5.00vs60.01±5.00、49.06±4.39、17.04±1.49、3.95+0.23，P<0.01)]。IL-2+CD137单抗联合IL-15组的对A549细胞的杀伤效率明显高于其它组[(93.14±3.27)%、(83.15±4.03)%、(71.25±3.24)%、(62.27±3.01)%、(49.38±2.35)%。P<0.01]。IL-2+CD137单抗联合IL-15组培养液上清中的IFN-γ的分泌水平明显高于IL-2+CD137单抗组、 IL-2+IL-15组、 IL-2组及对照组[(296.25±9.79) pg/ml vs(260.47±11.55) pg/ml、(201.13±6.36) pg/ml、(138.36±6.09) pg/ml、(38.42±3.56) pg/ml，P<0.01]。结论：CD137单抗联合IL-15能高效扩增NK细胞，扩增后的NK细胞高效杀伤A549肺癌细胞。