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硝基呋喃类兽药在水产、家畜养殖中违规使用现象普遍,本研究以硝基呋喃类兽药代谢物为研究对象,建立呋喃唑酮代谢物AOZ、呋喃它酮代谢物AMOZ、呋喃妥因代谢物AHD、呋喃西林代谢物SEM胶体金免疫层析试纸条快速检测方法,并应用于动物源性食品中硝基呋喃类兽药代谢物的可视化检测。呋喃唑酮代谢物AOZ胶体金试纸条的最适条件为:NC膜(硝酸纤维素膜)为MilliporeHF90s;胶体金粒径20nm;金标抗体最适工作pH为9;金标抗体中抗体使用量为20μg;羊抗鼠二抗稀释倍数10倍;金标抗体稀释倍数8倍;包被原浓度0.4 mg/mL;包被原与抗体均用PB稀释液稀释;划膜时二抗和包被原喷涂量0.3μL/cm;NC膜不需要封闭处理。呋喃唑酮代谢物AOZ胶体金试纸条检测限为0.5μg/kg(以NPAOZ计),检测时间约1Omin。动物源性食品检测限为0.1μg/kg(以AOZ计)。呋喃它酮代谢物AMOZ胶体金试纸条的最适条件为:NC膜(硝酸纤维素膜)为MilliporeHF90s;胶体金粒径20nm;金标抗体最适工作pH为9;金标抗体中抗体使用量为20μg;羊抗鼠二抗稀释倍数10倍;金标抗体稀释倍数5倍;包被原浓度2mg/mL;包被原与抗体均用PB稀释液稀释;划膜时二抗和包被原喷涂量0.3μL/cm;NC膜不需要封闭处理。呋喃它酮代谢物AMOZ胶体金试纸条检测限为2μg/kg(以NPAMOZ计),检测时间约1Omin。动物源性食品检测限为0.5μg/kg(以AMOZ计)。呋喃西林代谢物SEM胶体金试纸条的最适条件为:NC膜(硝酸纤维素膜)为MilliporeHF90s;胶体金粒径20nm;金标抗体最适工作pH为9;金标抗体中抗体使用量为40μg;羊抗鼠二抗稀释倍数10倍;金标抗体稀释倍数6倍;包被原浓度2mg/mL;包被原与抗体均用PB稀释液稀释;划膜时二抗和包被原喷涂量0.3μL/cm;NC膜不需要封闭处理。呋喃西林代谢物SEM胶体金试纸条检测限为3μg/kg(以NPSEM计),检测时间约1omin。动物源性食品检测限为0.5μg/kg(以SEM计)。呋喃妥因代谢物AHD胶体金试纸条的最适条件为:NC膜(硝酸纤维素膜)为MilliporeHF90s;胶体金粒径20nm;金标抗体最适工作pH为9;金标抗体中抗体使用量为30μg;羊抗鼠二抗稀释倍数10倍;金标抗体稀释倍数5倍;包被原浓度2mg/mL;包被原与抗体均用PB稀释液稀释;划膜时二抗和包被原喷涂量0.3μL/cm;NC膜不需要封闭处理。呋喃妥因代谢物AHD胶体金试纸条检测限为5μ/kg(以NPAHD计),检测时间约1omin。动物源性食品检测限为0.8μg/kg(以AHD计)。呋喃它酮代谢物和呋喃妥因代谢物多残留胶体金试纸条的最适工作条件为:NC膜(硝酸纤维素膜)为MilliporeHF90s;胶体金粒径20nm;金标抗体最适工作pH为9;金标抗体中呋喃它酮代谢物抗体和呋喃妥因代谢物抗体使用量分别为20μg和30μg;羊抗鼠二抗稀释倍数10倍;金标抗体稀释倍数5倍;包被原浓度2mg/mL;包被原与抗体均用PB稀释液稀释;划膜时二抗和包被原喷涂量0.3μL/cm;NC膜不需要封闭处理。呋喃它酮代谢物和呋喃妥因代谢物多残留胶体金试纸条检测限分别为2μg/kg和3oμg/kg(以NPAMOZ和NPAHD计),检测时间约1omin。动物源性食品检测限分别为0.3μg/kg和4μg/kg(以 AMOZ 和 AHD 计)。呋喃唑酮代谢物和呋喃西林代谢物多残留胶体金试纸条的最适工作条件为:NC膜(硝酸纤维素膜)为MilliporeHF90s;胶体金粒径20nm;金标抗体最适工作pH为9;呋喃唑酮代谢物抗体和呋喃西林代谢物抗体使用量分别为2oμg和40μg;羊抗鼠二抗稀释倍数10倍;金标抗体稀释倍数分别为8倍和6倍;包被原浓度2mg/mL;包被原与抗体均用PB稀释液稀释;划膜时二抗和包被原喷涂量o.3μL/cm;NC膜不需要封闭处理。呋喃唑酮代谢物和呋喃西林代谢物多残留胶体金试纸条检测限分别为5μg/kg和1Oμg/kg(以NPAOZ和NPSEM计),检测时间约1omin。动物源性食品检测限分别为0.5μg/kg和 0.8μg/kg(以 AOZ 和 SEM 计)。