一种生长抑素基因免疫的新策略研究

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生长抑素是由下丘脑分泌的一种神经多肽,能抑制GH释放进而抑制动物生长。DNA疫苗由于能同时诱导机体产生特异性的体液和细胞免疫反应等优点,已经成为研究者关注的焦点之一,但单独使用DNA疫苗在大动物或人体诱导的免疫反应效果不理想,必须改善现有免疫方式来增强其免疫原性,如基因枪的使用或佐剂的开发利用。基因枪尽管有其高效性,但所需装置昂贵,应用成本较高,因而限制其应用。佐剂的使用是比较理想的方式,但其大都需要特殊处理,符合特定标准,并同DNA疫苗混合后方可应用。另外,DNA疫苗也必须从工程菌中大量抽提出来,费时费力,这势必影响了实验的可操作性,也使实验的成本加大,不利于推广。因此,开发新型免疫策略已成为亟待解决的问题。本研究对一种生长抑素基因免疫的新方法进行了评估,即用含目的质粒的灭活菌体直接免疫(不用抽提质粒)来取代现行的质粒DNA免疫方法(质粒)。以纯质粒免疫组为参照组,同用灭活菌体免疫组进行比较,引用四个参数分别从不同的角度来评估,包括抗生长抑素抗体检测、生长测定、细胞免疫检测、脏器指数检测。1抗生长抑素抗体检测灭活菌体免疫组,在实验的各个时期,抗体P/N值均极显著高于质粒组(P<0.01)。在实验期,灭活菌体组的阳性鼠比例亦均显著高于纯质粒组,最大P/N值也出现在此组。并且灭活菌体组也使机体产生有效的免疫记忆或长期的免疫力。2生长测定即增重检测在增重实验中,灭活菌体组免疫亦表现出比纯质粒组的优势。加免两周时,灭活菌体组增重极显著高于对照组(P<0.01),显著高于纯质粒组(P<0.05)。加免四周后,两实验组增重极显著高于对照组(P<0.01),灭活菌体组增重极显著高于纯质粒组(P<0.01)。实验结束时,两实验组之间差异不显著(P>0.05),但灭活菌体组增重高于纯质粒组。3细胞免疫检测细胞免疫方面,进行了T细胞增殖和DTH两个实验。在T细胞增殖实验中,纯质粒免疫组和灭活菌体免疫组在诱导SS的特异性淋巴细胞增殖方面效果相似,二者差异不显著(P>0.05),但都优于各自对照组。DTH实验中无论是纯质粒组,还是灭活菌体组,左脚掌厚度与右脚掌厚度的比值P/N均大于1.0,且在第48h时比值达到高峰,但灭活菌体组和纯质粒组小鼠P/N之间差异不显著(P>0.05)。4脏器指数检测脏器指数是重要的生物学指标之一。灭活菌体免疫组同对照组在心脏指数、肝脏指数、肾脏指数、脾脏脾脏、肺脏指数上差异不显著(P>0.05),表明新免疫方法并不影响动物的正常生长发育。灭活菌体组在脾脏指数高于对照组和纯质粒免疫组,但差异不显著(P>0.05),表明灭活菌体免疫有免疫增强作用。基于以上实验结果,我们得到一种更为经济、方便、免疫效果更好、拥有独立知识产权的基因免疫方式,即这种免疫方式能刺激机体产生较强的细胞和体液免疫反应,使机体产生有效的免疫记忆或长期的免疫力,产生良好的免疫效果,是一种很有前途的基因免疫的新方式。
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