【摘 要】
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目的:探讨HSP27在卵巢癌耐药细胞系及敏感细胞系中的表达及其在卵巢癌顺铂耐药中的作用。方法:通过Real-time RT-PCR及western-blot检测卵巢癌细胞株OV2008和C13K中HSP27 RNA
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目的:探讨HSP27在卵巢癌耐药细胞系及敏感细胞系中的表达及其在卵巢癌顺铂耐药中的作用。方法:通过Real-time RT-PCR及western-blot检测卵巢癌细胞株OV2008和C13K中HSP27 RNA和蛋白的表达水平;将合成的针对HSP27基因的特异性siRNA及正义真核表达质粒pEGFP-C1-HSP27(命为p-HSP27),分别转染C13K和OV2008细胞。通过Real-time PCR及western-blot检测转染前后C13K及OV2008细胞中HSP27 RNA和蛋白表达的变化;MTT及流式细胞仪分别测定转染前后C13K及OV2008细胞对顺铂敏感性的变化。结果:(1)HSP27在C13K细胞中的表达水平显著高于OV2008细胞,差异有统计学意义(p<0.05)。(2)转染siRNA 48h,C13K细胞对顺铂的半数抑制浓度(IC50)为(7.7±0.3)μmol/L,明显低于转染空载体和未转染的C13K细胞,分别为[(17.6±0.3)、(17.0±0.2)μmol/L,p<0.05];转染正义质粒p-HSP27 48h,OV2008细胞对顺铂的半数抑制浓度(IC50)为(15.2±0.3)μmol/L,明显高于转染空载体和未转染的OV2008细胞,分别为[(3.70±0.3)、(3.5±0.2)μmol/L,p<0.05];(3)转染siRNA及正义质粒48h,再用顺铂作用24h,检测发现转染siRNA的C13K细胞的凋亡率比转染空载体和未转染的C13K细胞的调亡率明显增加,前者明显高于后两者(p<0.05);转染正义质粒的OV2008细胞的凋亡率比转染空载体和未转染的C13K细胞的调亡率明显下降,前者明显低于后两者(p<0.05)。结论:C13K及OV2008细胞内HSP27基因表达的强弱能够影响其对顺铂的敏感性,提示HSP27可能为卵巢癌顺铂耐药治疗中的一个潜在靶点。
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