海洋生物Ⅰ号抗鼻咽癌活性成分及其相关作用机理的研究

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 本文将新鲜海洋生物Ⅰ号搅碎后用尼龙膜过滤去水,沉渣用95﹪食用酒精浸泡数次,得到的粗提物采用系统溶剂法进行分离,然后用MTT法对分离得到的成分进行体外抗鼻咽癌CNE-2Z细胞活性筛选,并计算各成分24h、36h和48h的半数抑制浓度(IC50)。用以下方法进一步验证活性成分对CNE-2Z细胞增殖生长的抑制作用:以细胞培养和计数法测定生长曲线,用[3H]-脱氧胸苷掺入法(TdR)测定对DNA合成的影响。用以下方法探讨活性成分对CNE-2Z细胞生长抑制的作用机制:用荧光双染法和流式细胞术检测细胞凋亡;用流式细胞仪检测细胞周期的分布和凋亡率;用Western blot分别检测bcl-2、bax、p38MAPK、c-fos和c-jun蛋白表达;用RT-PCR检测p38MAPK、c-fos和c-jun mRNA表达。
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