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鹿皮作为一种传统中药,长期被人们食用,可治疗溃疡、妇女白带、肾虚滑精等各种疾病。鹿皮胶是用梅花鹿或马鹿的皮制得的,具有益气、补血、补肾等多种功能。其功效在《本草纲目》和《四川中药志》中均有记载。现代研究证实鹿皮胶因具有补血以及增强免疫力等功效而得到广泛应用。目前对鹿皮胶的研究也主要针对其补血、免疫调节和提高血清睾酮等功效方面,但对鹿皮胶的食用安全性尚无报道。此外,对鹿皮胶成分的研究主要集中在氨基酸、微量元素等小分子方面,而对多糖、蛋白质等主要生物大分子成分的研究相对较少。因此本研究对鹿皮胶进行系统的毒理学评价,在此基础上确定了一种简单方便的鹿皮胶多糖提取工艺,并对所提取多糖成分进行了纯度及结构分析;同时针对鹿皮胶多糖的抗氧化活性及对酒精肝损伤的保护作用进行研究。本研究的实施对于鹿皮胶的综合开发利用及在保健食品领域的推广均具有重要的现实意义。本试验研究内容及结果如下:1.首先对鹿皮胶进行毒理学评价,分别依次进行急性毒性试验、亚慢性毒性实验、骨髓细胞微核实验、精子畸形实验、以及Ames实验,通过五个实验结果来评价鹿皮胶的毒性。鹿皮胶毒理学评价实验结果表明:急性毒性试验中,鹿皮胶样品的小鼠经口急性LD50?10.00 g/kg,各个灌胃剂量对小鼠的质量、脏器指数、肝、肾功能无显著影响;亚慢性毒性试验中,各剂量组与对照组在血常规、血液生化指标、脏器系数、以及病理组织学等方面无显著性差异。小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验在剂量小于10.00 g/kg时,小鼠雌雄骨髓细胞微核率无升高。精子畸形试验结果显示各剂量组均无精子异常,Ames试验结果显示,鹿皮胶样品5个剂量对鼠伤寒沙门氏菌组氨酸缺陷型4菌株均无致突变作用,可见,鹿皮胶样品无毒且具有一定的食用安全性。2.利用水浴浸提法结合正交试验法对鹿皮胶多糖的提取工艺进行优化,随后进行DEAE-52纤维素柱层析,纯化的多糖再经Sephadex G-200凝胶柱层析以及红外光谱进行分子结构解析。由单因素分析结合正交实验法确定了鹿皮胶多糖最佳提取工艺为:最优提取条件为85℃提取温度、2.5 h提取时间、25倍料液比,提取2次,多糖得率达19.3%。采用水浴浸提法提取多糖,获得的粗多糖分别先后加入到DEAE-52阴离子交换柱和Sephadex G-200凝胶柱内进行进一步纯化,苯酚硫酸法追踪检测,纯化多糖形态为白色絮状,纯度为89.4%。通过碘-碘化钾等反应证明其不含淀粉、酚类物质、游离的氨基酸和蛋白质、末端无还原糖残基,多糖中含有糖醛酸,且为酸性多糖,通过红外光谱进行分析,推测该多糖是吡喃糖。3.评价鹿皮胶多糖的抗氧化作用。在体外抗氧化方面,检测·OH自由基、O2-·自由基的清除作用以及Fe3+还原能力。在体内抗氧化试验方面,皮下注射D-半乳糖来构建衰老模型,并用灌胃法给予小鼠对应的药品。6周后分别测定各组小鼠肝脏和血清中的SOD、GSH-Px酶活力及MDA含量。鹿皮胶多糖的体外抗氧化活性测定试验结果表明:鹿皮胶多糖具有一定的还原力,且与一定程度上的剂量相关（剂量设置为1、2、3、4、5mg/m L）。鹿皮胶多糖具有较强的·OH和O2-·清除作用。鹿皮胶多糖的体内抗氧化研究表明:各实验组小鼠体重均低于正常组,其中模型组在整体上体重最低。各剂量组在不同时间段,分别表现出显著性差异（P<0.05）和极显著性差异（P<0.01）。在鹿皮胶多糖对衰老小鼠血清的影响中,鹿皮胶多糖低剂量组和中剂量组与模型组比较,各个指标均无显著差异（P>0.05）,高剂量组SOD活性极显著升高（P<0.01）,MDA含量降低,具有显著差异（P<0.05）,GSH-Px活力无显著差异（P>0.05）。4.研究鹿皮胶多糖对小鼠急性酒精性肝损伤的保护作用。在低、中、高剂量组及阳性对照组分别给予鹿皮胶多糖及联苯双酯后,于最后一次实验时一次性给予50%的乙醇溶液。最后测定血清ALT、AST、GSH-Px、SOD的活力及MDA的含量,将小鼠肝脏制成石蜡和超薄切片,其余肝脏保存,备用待测定。所测抗氧化损伤指标包括MDA含量、GSH-Px、SOD活力。鹿皮胶多糖的预防急性酒精性肝损伤的活性研究试验结果表明:与模型组比较,鹿皮胶多糖血清各剂量组和联苯双酯阳性对照组的小鼠血中SOD、GSH-Px活性明显升高,均有显著或极显著差异（P<0.05,P<0.01）,ALT、AST活性、MDA含量明显降低,均有显著或极显著差异（P<0.05,P<0.01）。鹿皮胶多糖低剂量组的各项指标无显著性差异（P>0.05）,中剂量组MDA含量、SOD活性具有显著性差异（P<0.05）,鹿皮胶多糖高剂量组肝中MDA含量和SOD活性明显升高,具有极显著性差异（P<0.01）,GSH-Px活性具有显著性差异（P<0.05）。在造成小鼠急性酒精肝损伤后,鹿皮胶多糖各给药组的肝组织细胞呈现良好的改善效果,且鹿皮胶多糖高剂量组的改善效果最强。