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目的：在酶、细胞及整体水平研究间硝苯地平同系物的药代动力学，阐明间硝苯地平同系物的代谢特点，以期为该类药物的研发提供新的思路和方法。 方法：（1）采用一步法进行Hanstzch反应合成m-Nif；采用三步法合成MN9201和MN9202，首先分别以乙酰乙酸丙酯和乙酰乙酸戊酯为原料进行第一步反应合成3-氨基巴豆酸酯，然后以乙酰乙酸甲酯和间硝基苯甲醛在浓硫酸催化下进行第二步反应生成2-乙酰基-3-芳香基-丙烯酸甲酯，最后进行Hanstzch反应生成目标化合物MN9201和MN9202。合成的化合物采用熔点测定和紫外扫描的方法进行结构验证。（2）采用正交设计优化色谱条件和样品预处理条件。检测m-Nif和MN9201时，以碱化液的用量、乙醚提取次数、甲醇与水相的配比、水相的离子浓度和水相pH值为影响因素，根据L16（45）正交设计表进行正交实验；检测MN9202和MN9203时，以碱化液的用量、乙醚提取次数、乙腈与水相的配比和水相pH值为影响因素，根据L9（34）正交设计表安排实验。（3）Beagle犬分别iv给予m-Nif0.288mg·kg-1、MN9201 0.312mg·kg-1、MN9202 0.335mg·kg-1和MN9203 0.358 mg·kg-1。分别于iv后0，5，10，20，40，60，120，180，240，300，360，420，480和600min犬前腿部静脉采集血液标 第四军医大学俘士.学位论文本;19给予Beagle犬m一Nifl.152，3.456，z0.370mg·kg一，，分别于19后0，5，15，30，45，60，90，120，180，240，300和420min，犬前腿部静脉采集血液标本，肝素抗凝，离心得血浆，采用Rp一HPLC分析血浆中原型药物浓度，血浆药物浓度一时间数据用3P97药代动力学软件分析。（4）差速离心法制备Beagle犬肝微粒体酶后，0.4 p mol·L一‘的间硝苯地平同系物与1.0mg’mL一’的肝微粒体酶在37℃水浴中孵育不同时间（10一SOmin）后，用RPHPLC法测定孵育液中间硝苯地平同系物原型药物的浓度;0.4 p mol·L一’的间硝苯地平同系物与不同浓度的肝微粒体酶（0.5一2.5g’L一’）在37℃水浴中孵育30 min后，采用RP一HPLC法测定孵育液中间硝苯地平同系物原型药物的浓度;同样，不同浓度的间硝苯地平同系物与1.0mg’mL一‘的肝微粒体酶在37℃水浴中孵育30 min后，用RP一HPLC法测定孵育液中间硝苯地平同系物原型药物的浓度，并用所测浓度与反应速度做Linewoave一Brurk双倒数曲线，推导出药物的酶促动力学参数。 （5）在不同浓度和不同种类的人肝微粒体酶抑制剂存在下，将0.4 p mol·L一’的间硝苯地平同系物与1.09·L一‘的肝微粒体酶在37℃水浴中孵育30min，用RP一HPLC法测定孵育液中间硝苯地平同系物原型药物的浓度，观察不同选择性抑制剂对间硝苯地平同系物代谢的影响。（6）将0.8 p mol·L一‘的间硝苯地平同系物与新制备的大鼠肝实质细胞（10‘cells·mL一，）在37℃水浴中孵育不同时间（525min），离心，用RpHPLC法测定上清液中间硝苯地平同系物原型药物的浓度，再根据所得数据计算大鼠肝实质细胞体外对样品的清除率（Cl，。，itr。），预测IbJ硝苯地平同系物的体内清除率（Cl，。。iv口;redl’cte、）;在不同密度大鼠肝实质细胞中（1X105一IXlo，eells·mL一’），0.5乒m。z·L一’间硝苯地平同系物在37”C水浴条件下孵育15min后，离心，用RP一HPLC法测定上清液中间硝苯地平同系物原型药物的浓度;同样，不同浓度（0.2 3 第四润舜医大学博士学心比论文2.0 p mol·L一’）的间硝苯地平同系物与密度为1 x IO6eells·mL一’的大鼠肝实质细胞，在37“C水浴中孵育15min后，离心，用RPHPLC法测定上清液中间硝苯地平同系物原型药物的浓度。 （7）维拉帕米（P一gp的抑制剂）的浓度在5一150 p mol·L一‘范围内，0.8 p mol一l的间硝苯地平同系物与大鼠肝实质细胞（lxl06eells·mL一‘）在37“C水浴中孵育15min，离心，观察上清液中间硝苯地平同系物的浓度变化;在有维拉帕米（浓度为50协mol·L一‘）存在下，观察不同浓度的间硝苯地平同系物（0.2Zpmol·L一’）在大鼠肝实质细胞（lx106Cells·mL一’）孵育后，离心，上清液中药物的摄取情况。结果:（1）合成的化合物中m一Nif的熔程为212.8213.goC，MN9201的熔程为146一147℃，MN9202的熔程为78.5一79.soC;样品的含量均大于95%:而且合成的化合物在237nm和350nm处存在特征吸收峰。（2）血浆中间硝苯地平同系物的最佳提取条件相同，即取含药犬血浆0.smL，加入内标溶液0.05 mL，混匀，加入碱化液lmL，混匀后，再加入乙醚1 mL，涡流震荡lmin，离心smin（4000 r.min一’），分取上层有机相，用乙醚提取2次，合并提取液于尖底试管中，通风橱中挥干。检测m一Nif和MN9201的流动相组成为83%甲醇及17%磷酸盐缓冲液（pHS，10mmol·L一‘）;检测MN9202和MN9203的流动相组成为82%乙睛与18%水，流速lmL·min一，，检测波长为350nm。（3）m一Nif 19给药后在Beagle犬体内的代谢过程符合一室模型，其中低剂量 （1 .1 52 mg·kg一’）C，“为（20士5）林g