小鼠DEAF1抗体的制备及应用

来源 :三峡大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:frenta
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
  目的:制备小鼠DEAF1(Deformed epidermal autoregulatory factor-1)的单克隆抗体和多克隆抗体,探索该抗体用于免疫组织化学、Western blot、免疫荧光、免疫沉淀等分析技术中的可能性。   方法:首先应用重组DNA技术将Deaf1全长cDNA插入原核表达载体pET-28a(+)中,构建DEAF1的原核表达质粒pET-28a(+)-mDF1;然后转化该重组质粒至感受态E. coli. BL21中,经IPTG诱导高效表达出重组DEAF1蛋白;再以尿素梯度裂解包涵体纯化所获得的DEAF1重组蛋白作为抗原免疫Balb/C小鼠;最后直接取血获取鼠抗DEAF1的多克隆抗血清并通过杂交瘤技术制备鼠抗DEAF1的单克隆抗体,所得抗体的特异性、敏感性及亲和力用Western blot免疫荧光,免疫组织化学以及免疫沉淀等技术检测。   结果:成功获得了鼠抗DEAF1的多克隆抗血清,经免疫组织化学,Western blot,免疫沉淀,免疫荧光等实验技术分析鉴定,该鼠抗DEAF1的多克隆抗血清具有较高的敏感性、特异性及亲和力。   结论:成功制备了鼠抗DEAF1的多克隆抗血清;经验证,该多克隆抗血清可用于免疫组织化学、Western blot、免疫荧光、免疫沉淀等分析技术,从而为DEAF1的蛋白水平研究奠定了基础。
其他文献
  本文介绍了比例电磁阀的基本构成和控制原理,并介绍了比例压力阀和比例方向流量阀在AMT液压操纵系统中的应用。通过仿真分析的手段验证了电液比例阀在AMT液压操纵系统中的
G蛋白介导的信号转导途径广泛存在于真核生物中,并在生物体的生长发育过程中起着重要作用。G蛋白信号转导调节蛋白(RGS)能够增加Ga亚基的GTP水解速率,是G蛋白信号转导途径的负调控因子。拟南芥和大豆的研究数据表明,RGS蛋白调节植物生理过程,并在植物激素应答和非生物胁迫响应的信号转导途径中起作用。除水稻和大豆以外,甘蓝型油菜是另外一种重要的农业植物,是种植范围广泛的油料植物。目前,已在甘蓝型油菜中
长期以来,我国新闻界“报喜不报忧”的思维定势,让几乎所有主流媒体对灾难报道讳莫如深,即使面对灾难新闻,也多着眼于“灾难不是新闻,抗灾救灾才是新闻”①这种有救少灾的原
  基于结构场有限元仿真方法建立了传动装置换挡电磁阀球阀密封锥面模型,通过仿真计算不同密封锥面角度和密封锥面长度时球阀偶件应变和变形分布,得出了满足密封性要求的球阀
歌曲的演唱不仅仅是在舞台上展示自己的歌喉的声音艺术,同时也带有十分丰富的情感表情。演唱者只有将情感和声音完美的结合起来,对歌曲作品完美的诠释,才能创造出属于自己的
  本文通过对一种大流量低压比例阀的电流压力关系特性、流量特性、泄漏特性等动态特性进行详细的试验研究,探索该阀应用于特种车辆换挡过程中变速机构油缸操纵的可行性,为大
随着我国国民经济的迅速发展,摩擦学的主要任务不仅仅是单纯地减少摩擦和磨损,更加突出了保护生态环境和提高人类生存质量的作用。因此,在满足使用性能要求的同时,如何改善生态效
  本文介绍了运载火箭伺服机构中非常重要的一种原动机——高压煤油恒速液动机,分析了其工作原理及技术特点。为利用低黏度液体输出动力的场合提供了解决方案,对低黏度液体驱
  本文研究的新型伺服泵利用小功率交流伺服电机通过减速器驱动变量斜盘实现变量。新型伺服泵主要由双向变量泵、摆线内啮合齿轮泵、减速器、交流伺服电机、角度传感器组成
本文通过对荣华二采区10
期刊