促分裂原活化蛋白激酶（Mitogen-activated protein kinase, MAPK）介导的信号转导途径是一类广泛存在于真核生物中信号途径,在许多生命活动中扮演重要角色,几乎涉及所有的生理及病理过程。同样真菌的生长发育等生命过程也受其调控,研究表明MAPK途径在真菌的致病性、形态建成和应激反应等方面起着重要的作用。本研究以长柄链格孢（Alternaria longipes）为研究对象,成功的克隆了A. longipes的一个MAPKK基因-AlSte7,并构建了基因插入突变载体,利用聚乙二醇介导的方法,对A. longipes的原生质体进行转化,进一步通过PCR方法,筛选并验证得到了AlSte7基因插入突变体,通过和野生菌的比对研究,分析了AlSte7基因的功能。利用Ste7同源基因的保守序列设计简并寡核苷酸引物,结合RT-PCR和Tail-PCR技术从A. longipes中克隆得到了MAPKK AlSte7基因；该基因全长cDNA1356bp, DNA1513bp,含有三个内含子,均符合GT-AC法则；运用生物信息学软件对AlSte7基因进行碱基组成和氨基酸组成特征以及一级,二级结构等方面进行了分析,并与来源于其它真菌的Ste7同源基因进行了同源性比较。利用构建的AlSte7基因插入突变载体pCB1636-AlSte7以及M13F/M13R引物扩增重组质粒的PCR产物对A. longipes原生质体进行了转化,采用PCR方法筛并验证得到了AlSte7基因插入突变体。对AlSte7基因插入突变体和野生菌进行了比较研究,结果显示AlSte7基因插入突变体在PDA上生长的速度明显下降,约下降32～48%左右,且PDB培养后测干重转化子较野生菌的有所降低；AlSte7基因插入突变体也不能产生完全分化的孢子；人工接种未刺伤烟草老龄叶片,AlSte7基因插入突变体基本不能侵染烟草叶片,形成危害症状。而人为刺伤烟草叶片后,AlSte7基因插入突变体能侵染叶片,造成明显的症状,说明AlSte7基因插入突变体丧失了穿透寄主的能力,但并没有丧失寄主中的定殖能力。