背景和目的：　　随着对免疫球蛋白G（IgG）研究的深入，许多学者发现IgG并非仅由成熟的B淋巴细胞产生，在一些非B淋巴细胞中如癌细胞、神经元和免疫豁免器官（如眼睛和精子等）的上皮细胞可以产生IgG，并发现这些非B细胞来源的IgG发挥着一些特殊的作用，如促进肿瘤细胞的生长和转移。Margni等学者利用Con A分离法从血液中提纯出一种特殊的IgG，这种IgG具有异常的糖基化结构，使得IgG原有的对称空间结构发生改变，于是命名为非对称IgG。这种非对称的IgG在与抗原结合后不能引起下游的补体活化、ADCC、调理作用等免疫效应。据报道,体外培养的巨噬细胞和树突状细胞能够通过甘露糖受体与糖基化的 IgG结合。还有报道称，糖基化的免疫球蛋白 G能够与肾小球肾炎新月体中的巨噬细胞上的甘露糖受体反应。本研究的目的在于研究肿瘤来源的非对称IgG对巨噬细胞的功能有怎样的影响，并且在肿瘤免疫逃逸过程中是否发挥重要的作用。　　材料与方法：　　1．材料通过汕头大学医学院医学伦理审核，血液标本采集汕头大学医学院临床医学系在读的健康男性大学生，平均年龄25岁。肿瘤组织标本取自汕头大学医学院附属肿瘤医院病理科，标本量20例。　　2．组织总IgG提取离心后的肿瘤组织匀浆后提取的总蛋白用装有rProtein G的亲和层析柱纯化，与层析柱结合的蛋白质即为总IgG。　　3．分离对称、非对称IgG利用Con A Sepharose4B层析柱，将纯化的IgG加入层析柱，层析柱上的Con A可与高甘露糖型IgG结合，未结合的IgG即为对称IgG。　　4．银染将提取的蛋白质进行SDS-PAGE胶分离，再进行硝酸银染色技术，以检测目的蛋白的纯度。　　5．生物素标记 IgG用biotin标记试剂盒将蛋白质标记上生物素，作为免疫细胞化学染色的一抗。　　6.免疫细胞化学检测巨噬细胞标志物的表达以及非对称IgG与巨噬细胞的反应。　　7．巨噬细胞的分化和极化从外周血中分离外周血单个核细胞,然后用GM-CSF和M-CSF刺激单核细胞分化,再用IFN-γ加LPS以及IL-4分别极化巨噬细胞。　　8.细胞增殖活性检测用细胞增殖试剂盒检测细胞的增殖活性。　　9．甘露糖受体封闭实验先用D-甘露糖与巨噬细胞在细胞培养箱中孵育2个小时，然后加入非对称IgG刺激细胞。检测细胞的增殖活性。　　10．抗体预吸收实验先让非对称 IgG与甘露糖受体在37℃孵育2个小时，然后再作用于细胞。检测细胞的增殖活性。　　11．Real-time PCR技术检测巨噬细胞炎性因子和相关蛋白的mRNA的表达。　　12．蛋白芯片技术检测巨噬细胞分泌的炎性因子和趋化因子的表达。　　结果：　　1．肿瘤来源的非对称IgG的糖基位于重链的Fab段。　　2．M1巨噬细胞主要呈矮胖的圆形，有CD68、CD206、iNOS的表达；M2巨噬细胞主要呈长瘦的梭型，有CD68、CD206、CD163的表达。　　3.非对称IgG能够与巨噬细胞反应，而对称IgG不能。　　4．非对称IgG能够抑制M1巨噬细胞的增殖活性，促进M2巨噬细胞的增殖活性。　　5．经D-甘露糖封闭后，非对称IgG失去了对巨噬细胞的增殖活性的效应。　　6．经MR预吸收后，非对称IgG失去了对巨噬细胞的增殖活性的效应。　　7．非对称IgG能够降低M1相关的mRNA的表达，同时增加M2相关的mRNA的表达。　　8．非对称 IgG能够促进 IL-2、IL-4、IL-10、IL-15、MIP-1α的表达。同时，能够抑制TNF-α、IL-6、IL-8、IL-12、TIMP-1、Eotaxin-2的表达。　　9．经过非对称IgG刺激后的巨噬细胞上清液能够促进Hela细胞的增殖。　　结论：　　肿瘤来源的非对称IgG能够与巨噬细胞反应，从而影响巨噬细胞的增殖活性、mRNA表达以及炎性因子的分泌。此外，经过非对称IgG刺激后的巨噬细胞上清液能够促进肿瘤细胞的增殖。这说明肿瘤来源的非对称IgG可能在肿瘤免疫逃逸过程中发挥重要作用。