背景和目的　　 近年来，随着人民生活水平不断提高，饮食结构西方化，我国大肠癌的发病率呈现逐年升高趋势，发病率已占到常见肿瘤的第四位。大肠癌的预后与病变累及的范围直接相关。其五年生存率，局限于肠壁者为90％，淋巴结受累者为68％，而发生远处转移者仅为10％。因此，通过对普通人群进行筛查可以提高腺瘤性息肉和早期腺癌的诊断率，经结肠镜下切除息肉或手术切除，能显著降低大肠癌的发病率和死亡率。目前常用的大肠癌筛查方法包括粪便隐血试验、钡灌肠气钡双重造影、乙状结肠镜、结肠镜及仿真结肠镜等。粪便DNA检测是一种近年来新兴的非侵入性大肠癌筛查技术，它具有较高的敏感性和特异性，且无需特殊肠道准备。2008年3月美国癌症协会发布了最新的大肠癌早期诊断的筛查和监视指南，2009年2月美国胃肠病学院亦更新了大肠癌筛查指南，均将粪便DNA检测列为推荐的筛查方法之一。目前常用的粪便DNA检测方法是APC、KRAS、P53基因突变、微卫星不稳定性以及DNA甲基化等多项指标联合检测，费用昂贵，不利于推广应用。为了降低成本，国外有学者采用定量检测粪便中长DNA片段的方法诊断大肠癌，但国内尚未见报道。本文应用荧光定量PCR技术检测了30例大肠癌患者及30例正常对照者粪便中的长DNA片段，以探讨该项技术的在大肠癌筛查中的可行性。　　 材料与方法　　 选取2009年5月至2009年9月郑州大学第一附属医院收治的30例大肠癌患者为研究对象，均经内镜或手术病理证实。其中男性17例，女性13例，男女之比为1.31:1，最大年龄82岁，最小年龄21岁，平均年龄57.27±13.56岁。另选择30例年龄匹配的全结肠镜检查阴性者为正常对照组。其中男性15例，女性15例，男女之比为1:1，最大年龄79岁，最小年龄32岁，平均年龄54.23±12.83岁。病例入选标准：(1)不伴其他部位肿瘤，(2)留取标本前未经任何治疗，(3)收集粪便前5天内未进行任何侵入性操作，包括结肠镜、灌肠等。粪便标本于术前或内镜检查前收集，收集后立即送至实验室，分装后置-70℃冰箱保存备用。按QIAamp DNA Stool Mini kit(Qiagen，德国)说明书提取粪便中的总DNA。提取出来的DNA保存在200μl的AE缓冲液中，并置于-20℃冰箱中。参照文献的人特异性的Alu序列引物进行荧光定量PCR扩增检测。实验结果应用SPSS17.0统计软件处理。标准曲线制作应用直线回归法，各组间率的比较采用x2检验，各组间检测数值的比较采用秩和检验(wilcoxon法)。检验结果以P＜0.05有统计学意义。　　 结果：　　 1.60例粪便标本中59例均可检测到长DNA片段。　　 2.大肠癌组粪便中长DNA片段含量显著高于正常对照组(中位数为84ng/gvs4.9ng/g;P=0.001)。如果取150ng/g为正常上限，诊断大肠癌的敏感性为46.67％，特异性为100％。　　 3.左半结肠癌长DNA片段含量，显著高于右半结肠癌(中位数为281.5ng/gvs7.52ng/g; P=0.008)。粪便中长DNA片段含量与性别、年龄、肿瘤大小及Dukes分期等无关(P＞0.05)　　 4.粪便中长DNA片段检测大肠癌的敏感性显著高于粪便隐血试验(46.67％vs26.67％，P=0.031)。结论　　 1.荧光定量Alu PCR检测粪便中长DNA片段诊断大肠癌是简便、可行的方法。　　 2.粪便中长DNA片段含量与肿瘤发生部位有关，而与性别、年龄、肿瘤大小及Dukes分期等均无关。　　 3.与粪便隐血试验相比，具有更高的敏感性。　　 4.荧光定量Alu PCR检测粪便中长DNA片段的方法具有成本低的优势。