水深性抗生素ZwA高产发酵条件及其理化特性

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Zwittermicin A是由蜡状芽胞杆菌及苏云金芽胞杆菌产生的一种新型广谱抗生素,它是已知唯一的线性氨基多元醇类抗生素,对多种原核微生物、真核微生物的植物病原菌及细菌都有较强的抑制作用,对多数革兰氏阴性菌和一部分革兰氏阳性菌也有一定的抑菌效果,并且对苏云金芽胞杆菌制剂有很强的增效作用。因此Zwittermicin A的研究成为热点,但是由于缺少标准品,所以很多研究难以进行。本研究围绕Zwittermicin A产量进行了发酵条件的优化,同时利用等电聚焦电泳法对它的富集提取进行了初步探讨。   本研究从广西桂林喀斯特地貌的73份土壤样品中筛选出了16个Bt菌株,通过抗生素(Zwittermicin A)对草生欧文氏杆菌的抑菌活性检测进一步筛选菌株,得到高产菌株A164。然后对培养该菌株的碳源、氮源、时间等发酵条件进行了单因子优化,采用Plackett-Burman设计方法,确定了发酵条件的重要影响因子,根据爬坡路径法确定了各个因子的最适范围,应用响应面分析法对这些因子进行再次优化,得到最佳发酵条件为:蛋白胨17.56g/L,葡萄糖20.0g/L,硫酸镁0.18g/L,磷酸氢二钾1.30g/L,,氯化钙0.08g/L,硫酸锰0.08g/L,培养温度为28.3℃,时间为36 h,抑菌圈直径由1.104cm增加到1.322cm,增效20%。   通过等电聚焦电泳法测定Bt A164发酵液中的 Zwittermicin A(抗生素)的等电点,结合电泳样品对草生欧文氏杆菌的抑菌效果,测定出了该抗生素的等电点,其等电点约在3.59~3.81范围,为将来进一步分离提纯该抗生素提供了依据。Zwittermicin A的发酵液稳定性研究表明,保存条件为:温度4℃、pH2。  
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