论文部分内容阅读
目的:通过测定不同浓度的环氧合酶-2抑制剂塞来昔布对胰腺癌细胞增殖、侵袭、迁移能力以及对环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)、基质金属蛋白酶14(matrix metalloproteinase14,MMP-14)的蛋白表达影响来探讨COX-2抑制剂塞来昔布对胰腺癌的作用及相关作用机制。方法:1.体外培养人胰腺癌细胞系PANC-1细胞;2.分别用0(无)、20(低)、60(中)、100(高)μmol/L四个塞来昔布浓度对PANC-1细胞进行不同时间(24、48和72h)处理,MTT比色法检测细胞的增殖能力,Transwell侵袭实验和划痕实验检测细胞的侵袭能力和迁移能力,酶联免疫吸附剂测定(EILISA)法检测COX-2和MMP-14的蛋白表达情况;3.数据进行统计分析。结果:1.MTT结果显示不同浓度的塞来昔布作用24、48和72h后PANC-1细胞的增殖能力下降,随着塞来昔布浓度的增加,抑制作用逐渐增强,且随着塞来昔布作用时间的延长,抑制作用也逐渐加强,抑制作用呈时间和浓度依赖性(P<0.05);2.Transwell侵袭实验结果显示不同浓度的塞来昔布作用24h后PANC-1细胞的侵袭能力下降,穿过基质胶的细胞个数分别为300.654±12.558、271.041±10.569、184.003±10.865和92.667±7.567(F=237.182,P<0.05),呈浓度依赖性;3.划痕实验结果显示不同浓度的塞来昔布作用24h后PANC-1细胞的迁移能力下降,相对迁移距离分别为11.400±0.959、9.511±1.110、5.856±0.778和2.844±0.416(F=59.516,P<0.05),呈浓度依赖性;4.正常PANC-1细胞呈梭形或多角形,状态良好,细胞形态学提示不同浓度的塞来昔布作用24h后PANC-1细胞逐渐变圆、皱缩并开始出现死细胞;5.ELISA结果提示不同浓度的塞来昔布作用24h后胰腺癌细胞中COX-2和MMP-14的蛋白表达水平相应降低,均呈浓度依赖性,COX-2蛋白表达水平分别为0.876±0.023、0.682±0.027、0.505±0.022和0.384±0.019(F=262.537,P<0.05);MMP-14蛋白表达水平分别为7.955±0.297、7.031±0.178、6.072±0.209、和5.047±0.216(F=89.247,P<0.05);6.PANC-1细胞内COX-2和MMP-14的蛋白表达具有显著正相关性(r=0.873,P<0.05)。结论:1.COX-2抑制剂塞来昔布以浓度梯度、时间梯度的形式减弱人胰腺癌细胞系PANC-1的增殖能力,以浓度梯度的形式减弱人胰腺癌细胞系PANC-1的侵袭及迁移能力;2.COX-2抑制剂塞来昔布抑制COX-2表达后,可能通过下调MMP-14表达,进而以浓度梯度形式减弱胰腺癌细胞的增殖、侵袭、迁移能力,起到抗胰腺癌作用。