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目的:阿尔茨海默病(AD)是痴呆最常见的原因。神经细胞外β淀粉样蛋白(amyloidβ-protein,Aβ1-42)异常聚集形成的老年斑是AD的病理学标志。自噬是真核细胞中广泛存在的降解/再循环系统。生理条件下自噬对维持细胞稳态发挥重要作用。自噬功能的异常会导致变性蛋白和损伤细胞器的积累。在发病早期的AD患者脑内,发现大量自噬体的存在。自噬体-溶酶体系统也是近年来研究Aβ沉积的新方向。自噬的调控机制非常复杂,参与到自噬中的信号通路数量繁杂,相关研究表明,微小RNA通过调控自噬相关基因的表达,从而发挥对自噬进行调节作用。近年来众多研究显示微小RNA(MiRNAs)与AD的发生、发展密切相关。其中miR-181b在正常人脑脊液及血清中十分丰富而在AD患者中显著下降。已证实miR-181b促进神经细胞突触囊泡发育及促进其生长并能抑制和延缓突出囊泡的受损。这些研究表明miR-181与AD等神经系统疾病存在相关性,而miR-181b对AD细胞模型自噬的调节及其作用机制的信息很少。在此基础上,我们构建AD细胞模型,探讨miR-181b对AD细胞自噬的影响及其作用机制,可能为AD的预防和治疗提供新的靶标和方向。研究对象和方法:本研究应用PC12细胞(大鼠嗜铬神经瘤细胞)及Aβ25-35制备AD细胞模型,采用MTT法检测PC12细胞活性,检测加入Aβ25-35处理的细胞中透射电镜观察自噬体的数量、Western blot法检测自噬相关蛋白LC3-II蛋白的表达水平和P70S6K,AKT及其磷酸化的蛋白在细胞中的表达变化。通过实时荧光定量PCR确定miR-181b的表达量,进一步通过转染miR-181b mimic/inhibitor后,检测miR-181b对Aβ25-35处理的PC12自噬的影响。结果:本实验结果显示在Aβ25-35处理的PC12细胞中,细胞存活率下降。同时,自噬相关蛋白LC3-Ⅱ表达上调,透射电镜下观察到自噬体的数目增多、miR-181b表达水平下调。转染miR-181b mimic上调miR-181b可以保护PC12细胞免受Aβ25-35诱导的细胞毒性,提高细胞存活率,抑制Aβ25-35诱导的PC12细胞自噬。上调细胞内miR-181b水平后,与Aβ25-35组相比,p-AKT、p-mTOR、p-P70s6k蛋白水平明显提高,而转染miR-181b inhibitor后结果与之相反。结论:Aβ25-35可诱导PC12细胞自噬,在AD细胞模型中miR-181b表达下调明。在Aβ25-35处理的PC12细胞中过表达miR-181b抑制细胞自噬。MiR-181b可能以mTOR依赖的方式参与了Aβ25-35诱导的自噬的调控。