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本文以中药材土贝母为原料，采用溶剂法——柱层析法从中分离纯化得到抗癌活性成分土贝母皂苷（皂苷）和土贝母苷甲（苷甲），并重点研究了皂苷、苷甲的抗微管作用及对人低分化上皮样鼻咽癌细胞（CNE-2Z）凋亡的影响。 1．采用（?）KTATM explorer 100快速纯化工艺开拓系统，在实验条件下快速分离得到皂苷和苷甲，为土贝母皂苷成分分离提取工艺的简化作了有益的探索。 2．本文较系统研究了苷甲的抗微管作用，研究认为5μmol／L苷甲即可抑制离体条件下猪脑微管蛋白加热聚合，当其浓度在5～10μmol／L时，苷甲对微管蛋白聚合的抑制作用与苷甲的浓度呈正相关。 3．采用细胞免疫荧光法研究皂苷、苷甲对CNE-2Z细胞微管网络的影响。25μmol／L的皂苷、苷甲作用CNE-2Z细胞3h后，荧光图像显示其结果与2.5μmol／L秋水仙碱作用细胞3h的结果相似，荧光充满整个细胞质区域，正常细胞所具有的毛玻璃样微管网络消失，表明皂苷、苷甲引起细胞微管解聚，2.5μmol／L紫杉醇处理细胞3h后，细胞内荧光主要呈束状或晶核样，提示微管蛋白聚合。 4．采用透射电镜观察皂苷、苷甲对CNE-2Z细胞超微结构的影响。正常培养的细胞结构完整，微管清晰可见；25μmol／L的皂苷、苷甲作用24h后，多数细胞均不同程度受损，细胞的微绒毛减少乃至消失；微管网络消失；细胞变圆；内质网弯曲、折叠；线粒体受损，表现为线粒体肿胀或皱缩，数量减少；胞质内出现大量自噬泡；细胞核界限不完整，核固缩或碎裂；细胞质溶解，呈现典型的凋亡或坏死特征。50μmol／L皂苷作用24h，则大多细胞坏死。 5．蛋白免疫印迹结果证实10μmol／L皂苷、苷甲作用CNE-2Z细胞24h，细胞内聚合的微管蛋白减少，解聚的微管蛋白相应增加。25μmol／L皂苷、苷甲分别作用细胞1h，6h，12h和24h，细胞内解聚的微管蛋白比例呈时间依赖上升。 6．通过分子生物学方法进一步证实皂苷、苷甲诱导CNE-2Z细胞凋亡。试验条件下皂苷及苷甲均使细胞Bcl-2蛋白表达减少，Raf-1蛋白磷酸化活化。随着药物作用浓度升高，时间延长，Bax及磷酸化Raf-1蛋白表达增多。Raf-1蛋白因为磷酸化而活化，启动细胞凋亡；而Bcl-2和Bax分别抑制和促进细胞凋亡。