目的：研究白介素12（IL-12）和负载肿瘤抗原的树突状细胞（DC）对肝癌肿瘤浸润淋巴细胞（TIL）的增殖和细胞毒作用的影响，探讨IL-12和DC增强TIL特异性杀伤肿瘤细胞的可能性。为肝癌TIL的过继免疫治疗提高疗效而寻找可能的方法。 方法：本研究将原发性肝癌手术切除的实体瘤进行体外分离、分别用含IL-12（5pg／ml）的培养液以及含IL-12+IL-2(100U／ml的完全培养液培养，诱导肿瘤浸润淋巴细胞（TIL）的生长。以含低浓度IL-2（100U／ml）的完全培养液作对照组。培养10～14天，分别进行TIL细胞杀伤率的测定、TIL扩增能力的测定、细胞因子的测定和流式细胞仪（FCM）检测TIL细胞表型CD₃、CD₄、CD₈、CD₁₆₊₅₆的表达。另外，联合应用GM-CSF（800U／ml）和L-4（500U／ml）对原发性肝癌病人外周血分离单核细胞进行体外诱导，后给于自体癌细胞抗原进行刺激，制备负载肿瘤抗原的DC。一周后与自体TIL混合培养7天，计数TIL增殖数量；以及用FCM测定混合培养前后TIL的免疫表型；同时测定TIL的细胞杀伤率和培养上清中细胞因子的含量。实验结果采用（X±SD）表示，两组比较用t检验，多组比较用单因素方差分析，所有统计学处理均用SPSS 8.0软件完成。 结果：①IL-12+IL-2组和单用IL-12组对自体肝癌细胞的细胞杀伤率比IL-2组明显增高（P＜0.001；P＜0.01）前者具有高度显著性意义；对SK-hep-1、K562肿瘤细胞的细胞毒作用也有显著性差异（P＜0.05）但对自体肝癌细胞比对SK-hep-1、K562肿瘤细胞具有更强的杀伤力，表明特异性作用更强（P值均小于0.01）。②IL-12+IL-2组比IL-2组CD₃⁺,CD₄⁺，CD₈⁺比例升高明显，差别有显著性。（P＜0.01）；CD₁₆₊₅₆增多不明显，无统计学意义。 肝癌TIL过继免疫治疗的实验研究 中文扬要 ③1卜12＋1卜二组比1卜二组扩增能力明显增强（P叩刀5），而1＊＊二 组和 IL上组相比，IL＊ 2组细胞增殖稍高，但无统计学意义o＞ 0．05)④TIL在含IL毛O／m！)完全培养基中与负载肿瘤抗原 DC混合培养，较单纯在IL上厂 加l)完全培养基中增殖效果明 显（P＜0．01人⑤分泌细胞因子IF’N－Y和TNFJ的量较较未接爱 负载肿瘤抗原DC刺激的TIL明显提高，（P＜0刀卜③DC刺激 的＊IL对自体肝癌细胞的细胞毒作用显著性增强（＊＜o．0n：两 组对自体肝癌细胞毒作用明显强于对SK七epl、K562肿瘤细胞 的细胞毒作用（＊＜0．01：＊＜0．05）。 结论：门）白介素 IZ作为诱导剂诱导肝癌 TIL和负载肿瘤 抗原的DC刺激TIL均可明显增强TIL细胞的特异性细胞毒作用 和促增殖作用，但对自体肝癌细胞比对SK上epl、K562肿瘤细 胞具有更强的杀伤力，表明特异性作用更强叫 ＊）IL＊二加小剂 量 IL上可明显提高 TIL的抗肿瘤作用，而单用 ILIZ比用！L毛 效力上虽有差异但差异较小。因此ILJ二和小剂量！LZ具有协同 作用。3）IL刁 诱导和DC活化的TIL均对自体肝癌细胞比对 SK山ePJ、K562肿瘤细胞具有更强的杀伤力，表明特异性作用 更强。H)IFN－Y、TNFJ等细胞因子的增加使TIL的抗肿瘤 效力更强。 由此可见，IL＊二和DC能增强TIL特异性杀伤肿瘤细胞的 作用，该研究结果为肿瘤的TIL过继免疫治疗疗效的提高提供了 新的依据，为进一步的临床应用莫定了基础。