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重金属污染事件层出不穷,愈演愈烈,畜禽产品重金属残留不同程度超标,威胁人畜健康。快速、廉价地监测生境中重金属是减小其对人类及动物危害的先决条件。建立更快速、更经济的免疫分析法检测重金属是生产及经济发展的需要。本研究旨在建立能够稳定分泌高亲和力和特异性抗重金属汞、铜和锌的单克隆抗体的杂交瘤细胞株,克隆抗重金属汞、铜和锌单克隆抗体的重链和轻链可变区基因,建立其免疫分析方法并得到初步应用。本研究将重金属（汞、铜和锌）通过双功能螯合剂与血蓝蛋白偶联制备了免疫抗原,与牛血清白蛋白偶联制备了检测抗原。通过BCA法、紫外分光光度法、SDS-PAGE电泳和石墨炉原子吸收光谱法鉴定重金属汞、铜和锌螯合物人工抗原。用合成的免疫抗原免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术建立能稳定分泌抗重金属汞、铜和锌单克隆抗体的杂交瘤细胞株,分析杂交瘤细胞的染色体,鉴定。通过抗体亚型鉴定试剂盒鉴定单克隆抗体的类和亚类,通过体内诱导法大量制备并纯化抗体,通过间接酶联免疫吸附测定（ELISA）法检测抗体效价、亲和力和细胞株分泌抗体的稳定性,间接竞争ELISA（IC-ELISA）法测定抗体的特异性。通过提取杂交瘤总RNA、RT-PCR,扩增抗体可变区基因,克隆测序分析该基因。采用矩阵实验确定抗原抗体的最佳组合,通过对封闭物、pH值、离子强度等影响因子的研究,确定IC-ELISA的最佳工作参数。研究结果表明:成功制备了汞、铜和锌的免疫抗原和检测抗原,并建立了能稳定分泌特异性抗重金属汞、铜和锌单克隆抗体的杂交瘤细胞株分别为3G4-G5、9D11-F3和Z1A5,抗体均为IgM亚类,轻链为kappa型,亲和力达109L/mol～1010L/mol,半数抑制浓度（IC50）分别为1.15μM、0.257μg/mL和0.628μg/mL,与其他金属的交叉反应低。从杂交瘤细胞3G4-G5、9D11-F3和Z1A5中克隆得到了抗重金属汞、铜和锌单克隆抗体的重链和轻链可变区基因。在IC-ELISA最佳工作参数确定的情况下,建立定量测定金属离子汞、铜和锌的方法,检测范围（IC20～IC80）分别为0.15μM～9.0μM,0.055μg/mL～1.198μg/mL和0.062μg/mL～6.341μg/mL,最低检测限分别为3.94×10-5mM,0.0227μg/mL和0.015μg/mL。水样中的汞、铜和锌添加回收率为分别为88.9%～107.3%,87.4%～106.8%和88.6%～109.4%。本研究成功制备了重金属汞、铜和锌抗原,建立了3株能稳定分泌高亲和力、高特异性抗重金属汞、铜和锌单克隆抗体的杂交瘤细胞,且克隆得到了抗重金属汞、铜和锌单克隆抗体的重链和轻链可变区基因,为下一步通过基因工程改造抗体奠定了基础。建立重金属汞、铜和锌残留IC-ELISA检测法,并能有效地用于实验室水样的重金属汞、铜和锌残留检测,为重金属汞、铜和锌残留检测试剂盒的研发奠定了基础,为农畜产品及环境安全检测提供了重要的工具,对提高风险评估工作的效率和质量,保障食品安全有重要现实意义。