鼻咽癌中PCDH17基因启动子甲基化状态的研究

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目的探讨鼻咽癌(Nasopharyngeal carcinoma,NPC)中PCDH17基因启动子区CPG岛的甲基化状态,以及其对PCDH17mRNA转录、蛋白表达的影响。探讨PCDH17基因在鼻咽癌中所起的作用。方法运用半定量反转录PCR(reverse transcription polymeraseChain PCR, RT-PCR)和甲基化特异性PCR(Methylation-specific PCR,MSP)检测5株鼻咽癌细胞株,人喉鳞癌细胞株(Fadu),正常鼻咽上皮永生细胞系(NP69)中PCDH17mRNA的表达情况及PCDH17的甲基化情况。用MSP检测鼻咽癌及正常组织中PCDH17DNA CPG岛的甲基化情况。应用去甲基化药物处理细胞株后检测PCDH17mRNA表达的变化及PCDH17基因甲基化的改变。构建PCDH17质粒转染细胞得到稳定细胞株后,应用细胞克隆形成实验及划痕实验检测PCDH17在鼻咽癌中的功能。结果本研究检测到鼻咽癌细胞株5株中均无PCDH17mRNA表达,Fadu中无表达,NP69中有表达。鼻咽癌组织中甲基化率为83.3%(35of42),正常鼻咽组织的甲基化率为17.6%(3of17)。正常组织与鼻咽癌组织之间甲基化率有统计学差异(P<0.0001)去甲基化药物处理细胞株后PCDH17mRNA表达上调。本研究得出细胞功能实验提示PCDH17可以抑制鼻咽癌细胞(CNE-1)的克隆形成及迁移能力。结论该研究得出鼻咽癌细胞株中PCDH17基因CPG岛甲基化导致PCDH17mRNA表达下调,同时提示PCDH17基因在鼻咽癌中发挥着抑癌基因的功能。
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