本研究旨在通过对注射重组质粒DNApcDNA3／SjHrGPRT的家兔局部肌肉刺激试验、豚鼠全身过敏试验、小鼠组织分布及基因整合的研究，对日本血吸虫候选基因疫苗pcDNA3／SjHGPRT的临床前安全性进行初步研究。 方法 SDS碱裂解法大量提取质粒DNA，聚乙二醇法进行纯化；肌肉注射免疫接种实验动物；观察pcDNA3／SjHGPRT。在小鼠注射部位组织及主要脏器的分布；观察家兔局部肌肉刺激反应症状，并进行组织病理学检查；观察豚鼠免疫接种后过敏反应症状；质粒DNA在组织中的分布采用PCR法检测。 结果 1、采用SDS碱裂解法联合聚乙二醇纯化法，成功大量制备质粒pcDNA3／SjHGPRT，纯度符合实验要求，无菌试验阴性。 2、随机将小鼠分为3组，实验组免疫接种剂量为150ug，于免疫接种后12小时、1周、3周、6周分批处死。接种后12小时即可在小鼠血液、心、肝、脾、肺、肾组织及注射部位肌肉中检测到质粒分布，接种后3周仍可在注射部位肌肉组织及个别脏器组织中检测出，至接种后6周不再检出。 3、pcDNA3／SjHGPRT肌肉注射后48小时，注射局部肌肉可见小范围充血出血，肌肉局部刺激轻微，组织病理学观察发现局部炎性细胞浸润，偶见少量肌细胞变性坏死。 4、pcDNA3／SjHGPRT豚鼠全身过敏试验显示，大部分豚鼠未出现过敏反应症状，个别出现弱阳性过敏反应，但短时间内即可自行缓解。 结论 1、采用碱裂解法联合聚乙二醇纯化法成功大量制备质粒DNA，其操作过程较易控制、花费较低，经多次重复，效果一致。 2、肌肉注射pcDNA3／SjHGPRT后，可在组织中广泛分布，持续分布时间为接种后3周，随后质粒DNA不再被检出，证明其与小鼠基因组DNA整合危险性极小。 3、家兔肌肉注射pcDNA3／SjHGPRT后，局部刺激轻微，pcDNA3／SjHGPRT可用于肌肉注射；注射局部病检发现炎性细胞浸润，可能与疫苗接种时机械损伤及外源抗原诱导的免疫应答有关。 4、pcDNA3／sjHGPRT免疫接种几乎没有致敏性，可出现一过性弱阳性过敏反应，即刻可自行缓解。