基于液质联用的类脂组学方法发展及在疾病研究中的应用

来源 :中国科学院研究生院 中国科学院大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:pluto529
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近年来,类脂组学随着分析技术的发展和生命科学的需求而迅速崛起。本论文采用液质联用技术,将磷脂轮廓分析应用到备受关注的多不饱和脂肪酸(PUFAs)的作用机理、糖代谢异常和卵巢肿瘤的研究,建立离线二维液相色谱与质谱联用的类脂分析方法并用于肝中类脂定性分析。主要结果如下:   1.将磷脂轮廓分析方法应用到n-3PUFAs(EPA和DHA)对细胞紧密连接膜微区域中主要磷脂影响的研究。发现EPA或DHA能使脂酰链为PUFAs的磷脂含量显著增加,为n-3PUFAs对紧密连接作用的机理研究提供新信息。   2.发展了血浆的代谢组学方法并改进磷脂轮廓分析的数据处理方法,将两者应用到糖代谢异常的两个阶段-空腹血糖受损和初诊糖尿病的研究,利用代谢物相关网络和保留规律等鉴定代谢差异性类脂。发现可能与病情发展趋势相关的差异性类脂有FFA、LPC、lyso-pPC、PE、SM、PC和alkPC。   3.将磷脂轮廓分析方法应用到卵巢肿瘤的研究。结合良性和恶性卵巢肿瘤的病程发展特点和实际样品病理分型信息,进行分组处理数据。发现磷脂在两者中的变化既有共性也有个性,pPE、pPC、alkPC、PC、SM和LPC在卵巢肿瘤中变化显著。其中pPE、pPC和alkPC有可能用于辅助卵巢癌的临床诊断及预后判断。   4.建立了正相-反相结合的离线二维液相色谱与质谱联用的类脂分析方法并应用到肝组织类脂的分析。通过优化柱平衡条件改善正相色谱保留时间重现性,保证馏分收集的准确性。选择适合类脂分析的高柱效反相柱作为第二维分析柱,并建立30分钟内分离类脂的方法,结合保留规律和不同碰撞能下二级质谱图的特点解决醚磷脂结构鉴定的难题。此离线二维液相色谱与质谱联用的方法在肝组织类脂定性分析中表现出强大的分离及定性能力,共鉴定TAG、PE和PC三种类脂近800个分子的结构。
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