【摘 要】
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在茄科、玄参科和蔷薇科的配子体自交不亲和植物中,一类具核酸酶活性的蛋白质,称为S-核酸酶是S位点在花柱中的编码产物.多年来,许多实验室致力于寻找S位点在花粉中的编码产物
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在茄科、玄参科和蔷薇科的配子体自交不亲和植物中,一类具核酸酶活性的蛋白质,称为S-核酸酶是S位点在花柱中的编码产物.多年来,许多实验室致力于寻找S位点在花粉中的编码产物,既花粉S基因.最近,我们实验室从玄参科的金鱼草中分离到了一个S位点编码并在花粉中特异表达的F-box基因(SLocus F-box)-AhSLF-S<,2>,该基因距离S<,2>-RNase仅有9kb,是迄今为止最有可能的花粉S基因.为了研究该基因编码蛋白的功能,我们开展了蛋白亚细胞定位和转化的研究.首先,我们制备了针对AhSLF-S<,2>的多克隆抗体,并利用该抗体对其亚细胞定位进行了初步研究.结果表明,AhSLF-S<,2>是一种胞质蛋白,主要存在于花粉抽提液的上清中;体外萌发16小时的花粉管中,仍可检测到AhSLF-S<,2>的存在,暗示其在花粉延伸过程中起作用.对体外萌发的花粉管进行免疫金标定位后发现,金颗粒在花粉管中散在分布,在内质网区有集中的趋势,这一定位与其在自交不亲和反应中的推测功能相一致.其次,我们对自交不亲和金鱼草的组织培养及转基因条件进行了初步摸索,探讨了不同因素的影响,建立了对于自交不亲和的金鱼草的一种有效的再生系统.利用该系统进行农杆菌介导的遗传转化,观察到了外源基因的瞬时表达.我们正在进行进一步的实验,希望能得到AhSLF-S<,2>的转基因植株并研究它的遗传功能.
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