大鼠骨髓间充质干细胞体外定向分化为心肌细胞的实验研究

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骨髓基质细胞(BMSC)具有干细胞的特性并能分化为间充质组织。我们从大鼠骨髓单个核细胞(BMNC)中分离间充质干细胞(MSC)。体外培养的骨髓单个核细胞来源的间充质干细胞呈现纤维状,用 12μmol/L 5-氮胞苷(5-aza)处理细胞,细胞的表型随即发生变化。在相差显微镜下观察,一周后,细胞的体积增大,并朝一个方向延伸,形成杆状,两周后,这些细胞与临近的细胞融合,并在三周后,形成类心肌管状结构。通过 RT-PCR 检测后,在诱导前他们都表达 α-skeletal actin、desmin 和 MEF-2D,在诱导后 β-MHC 和 GATA4 才表达。western blot 结果表明 α-actin 在诱导前后都表达而myosin 则在诱导后才得以表达。利用免疫荧光方法标记 α-actin 和 β-MHC 两种蛋白质发现在诱导前后整个细胞都表达 α-actin,而在诱导后 myosin 才在细胞质中表达。这些结果表明分化的骨髓单个核细胞来源的间充质干细胞具有向新生心室肌分化的潜能,而且它处于心肌祖细胞和分化后的肌细胞的状态之间,并且这些细胞可为心肌梗塞移植治疗的提供一种潜在的供体细胞。
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