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B3、C3是以四氢异喹啉为母核合成的两种化合物.我们实验室的一些前期研究表明这两种化合物能抑制P-gp功能,是较有效的MDR逆转剂.对人红白血病细胞株K562/A02耐药细胞系的阿霉素(ADM)、长春新碱(VCR)细胞毒性有增敏作用,能增加K562/A02耐药细胞系的罗丹明123(Rhodamine 123,Rh123)的积累.该论文成功建立了脑微血管内皮细胞的原代培养作为血脑屏障的体外模型,并在此基础上研究B3、C3对血脑屏障上P-gp功能的调节作用.在此基础上,应用荧光探针DPH测定细胞膜脂质流动性,差速离心法制备细胞质膜,并用分光光度法测定细胞膜ATP酶活性,从而间接反映细胞膜上P-gp功能活性,进一步探讨B3、C3体外逆转MDR的机制,具有一定创新性.结果表明,1)B3、C3能明显抑制血脑屏障上P-gp功能,且这种抑制作用可逆,即并不影响P-gp作为生理屏障的正常外排异物功能:10 μ mol/L C3极显著提高RBMEC内Rh123摄取浓度(P<0.01);3、10 μ mol/L B3,1、3 μmol/L C3均显著提高RBMEC内Rh123摄取浓度(P<0.05).培养基中去除B3后90min、去除C3后6h,RBMEC内Rh123浓度与PBS对照组比较无显著性差异(P>0.05).2)与K562相比,K562/A02对VCR诱导的细胞凋亡产生耐受.各剂量组的B3、C3与K562/A02共同孵育24h后对K562/A02细胞凋亡率没有明显影响,但B3、C3均能显著提高VCR诱导K562/A02凋亡的细胞凋亡率.3)B3、C3均能剂量依赖性抑制MCF-7/ADM细胞膜P-gp功能,使MCF-7/ADM细胞内Rh123摄取明显升高(P<0.05,P<0.01).4)B3、C3对RBMEC上P-gp mdrla表达水平没有明显影响.5)降低耐药细胞细胞膜脂质流动性可能是B3逆转MDR的又一机制:1、3、10 μ mol/L的B3可显著降低K562/A02细胞膜脂质流动性(P<0.05,P<0.01).C3亦可降低K562/A02细胞膜脂质流动性,但与对照组相比无显著性差异.6)1、3、10 μ mol/L的C3可显著提高K562/A02细胞膜Mg<2+>-ATP酶活性(P<0.05,P<0.01),且呈明显的剂量相关性;3、10 μ mol/L的B3可显著提高K562/A02细胞膜Mg<2+>-ATP酶活性(P<0.05).从我们的实验结果,作者认为C3逆转P-gp功能的活性要强于B3,但二者作为新一代的P-gp抑制剂,对于肿瘤多药耐药逆转,都是有一定开发价值和应用前景的.