高致病性PRRSV广东云浮株的分离鉴定与遗传背景分析

来源 :华南农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xiaosheng2099
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
本研究于2007年从广东云浮地区分离和鉴定了一株猪繁殖与呼吸综合征病毒变异株,并对分离病毒的基因组序列进行了克隆和序列测定及遗传背景分析。试验对疑似为高致病性猪繁殖与呼吸综合征病猪的病料采集处理后,接种于易感细胞Marc-145细胞进行病毒培养,经过三代盲传,出现了典型的细胞病变,从病料中分离了一株PRRSV,命名为Yunfu07。本研究应用针对PRRSV的N基因的特异性引物Q1/Q2,通过RT-PCR技术对毒株进行检测,结果为阳性。试验对分离病毒进行了鉴定,病毒的TCID50为10-5.5/0.1mL;病毒为RNA病毒;Yunfu07株经56℃处理1小时后丧失对细胞的感染力;病毒培养的最佳pH值是6.8-7.2;病毒动物回归试验表明,分离毒株接种28日龄的仔猪,临床表现体温升高和一定程度的呼吸道症状。 试验参考VR2332和CH-1a株基因序列,设计了17对PRRSV的全基因序列引物,对Yunfu07株进行了RT-PCR扩增。试验对扩增出的基因片段进行克隆和序列测定,应用DNAstar生物学软件对所测得的序列进行处理后,结果显示Yunfu07株基因组全长15331bp。将Yunfu07株与VR-2332、Lelystad virus(LV)和其他11个分离株进行相似性比较,结果显示Yunfu07株与其它美洲型毒株的全基因组核苷酸序列相似性处于87.3%-98.7%之间,高于与欧洲毒株LV的相似性(仅为59.8%)。从而表明Yunfu07株属于美洲型毒株。序列分析表明,该毒株是一个天然存在缺失的变异毒株,与美洲型标准毒株VR-2332进行比较,共有39个氨基酸缺失。与高致病性PRRSV分离株一致的是,Yunfu07株的Nsp2有编码1个氨基酸的3个碱基缺失和编码29个氨基酸的连续87个碱基缺失。与GenBank上的其它PRRSV毒株相比,其ORF1a的Nsp2存在编码9个氨基酸的连续27个核苷酸的缺失。本研究结果补充和丰富了PRRSV毒株的基因组信息数据,为深入研究该毒株的遗传与变异及其与生物学特性的关系奠定了基础。
其他文献
从近几年的高考卷来看,高考中的试题覆盖面广,注重回归教材,以考查基本概念、规律为主,运用的方法也是基本的思维方法,加之高三复习,时间紧,任务重,如何对对教学大纲和考试大
时代在进步,科技在发展.在信息化的环境下,教学模式也发生了很大改变.作为一名体育教师,紧跟时代步伐,将信息化教学引入课堂刻不容缓.这篇文章就信息化在小学体育课中的应用
记叙文是对日常生活中的人物、事件、环境的叙述和描写,初中生以记叙文为写作重点,但就初中生记叙文写作现状来看,无论是教与学都存在诸多问题.细节描写是描写的最基本的组成
卖方分析师荐股的过度乐观倾向及证券研究行业监管政策的有效性,直接关系到证券市场信息效率与中小投资者权益保护.本文以2008~2017年A股市场卖方分析师盈余预测数据为样本,对
在新课改背景下,对小学语文教学方法予以创新,不仅可以改变小学语文课堂教学现状,还能够提高学生的课堂学习效果,促进语文知识的学习进步.文章先对小学语文教学方法创新的作
阅读是小学语文教学的重要内容,培养学生阅读审美能力对小学生语文综合能力的提升有重要意义.本文主要分析了小学阅读审美的特点及阅读审美教学的意义,并探讨小学语文审美教
单核细胞增生性李斯特菌(Listeria Monocytogenes,LM)是李斯特菌属的重要成员,属于细胞内寄生的革兰氏阳性杆菌。目前在病原学上已被世界普遍公认为一种人畜共患病和食源性疾病
农田栽参质量综合评价常维春,张连学,赵立波,曹秀英,孔祥义(中国农业科学院特产研究所132109)人参是珍贵的中药材,它源于林下,长期来模拟野生生态条件一直采用林地腐殖土进行栽培。这种伐林
《史记》中的屠岸贾在后世的文学演绎中成为最为著名的奸臣形象之一,但就《史记》的整体叙述而言,关于屠岸贾的言语行为十分有限,叙述平实,甚少修饰.据其职务而论,屠岸贾以中
素有“才女”之称的小慧(笔名),真名叫史慧芳,是解放军工程兵工程学院的学员。她的芳名不仅常常出现在学院文艺汇演的节目单和获奖单上,也常常出现在军内外的报纸杂志上。仅去年她