疫苗中牛血清残存量检测试剂的研究——抗牛血清白蛋白单克隆抗体的研制

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本文记述了为检测疫苗残存牛血清而建立抗牛血清白蛋白单克隆抗体杂交瘤细胞株及其分泌的抗体理化性质和生物学特性的鉴定过程。用牛血清白蛋白免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0在PEG作用下进行融合,培养上清经过双抗体夹心法初步筛选出分泌鼠IgG的杂交瘤细胞,此种初筛的单克隆杂交瘤细胞经注射小鼠产生的腹水单抗用间接ELISA法筛选出能稳定分泌抗牛血清白蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株,共获得四株,分别命名为2A5、3A3、3G6、4A8。通过鉴定证明:2A5为IgG2a/k,其余三株为IgG1/k;腹水效价均可达到1:128000;四株单抗均不与人和马、猪、羊、兔、豚鼠等血清发生交叉反应;WesternBlotting证明四株单抗均识别分子量为6800的牛血清白蛋白;四株单抗相对亲和力及相对敏感度大小依次为3A3>2A5>4A8>3G6;四株杂交瘤细胞株的染色体计数为93、91、92、90;杂交瘤细胞株连续培养三个月以及冻存半年后复苏,细胞生长良好,杂交瘤细胞分泌的抗体效价稳定。
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