ADAM19胞质尾和ArgBP1,beta-cop及ubiquitin相互作用位点的鉴定

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ADAM(proteins containing A Disintegrin And Metalloprotease domain)家庭是一类锚定子细胞膜的细胞表面蛋白家庭.该家庭含有四个比较保守的潜在功能域:蛋白水解或、粘连域、融合域和胞内信号域.由此,它们可能在细胞外基质的水解,细胞-细胞和/或细胞-基质的粘连、细胞融合及信号传导等细胞活动中具有重要作用.ADAM19具有ADAMs典型的功能域.已经证实ADAM19参与水解加工神经调节蛋白(neuregulin,NRG)的过程.该实验室采用酵母双杂交系统,以ADAM19胞质尾作为靶蛋白,在人胎脑cDNA文库中筛选与其相互作用的蛋白质,以期对ADAM19的功能有进一步了解.前人工作已经获得了4个目的蛋白,测序表明分别为ArgBP1(具完整的C-端,96-475aa),beta-cop,ubiquitin(泛素)以及一未知功能蛋白(编号AD58)部分编码区.该文工作是通过系列缺失确定蛋白相互作用的确切位点,以期能对这个相互作用对功能的贡献做一探讨.在ADAM19和ArgBP1的作用里,前者的SH3 binding sites和后者的一个proline-rich domainP4是结合的关键位点.而ADAM19与beta-cop的作用位点则几乎为前者的整个胞质区,从24aa到231aa.ADAM19则依赖C末端的后半段(119-231aa)与ubiquitin结合.这些结合的不同区域暗示了ADAM19作用的多样性,也许部分阐释了它功能的多样性.此外,我们还检测了ArgBP1与ADAM家庭其他成员ADAM22,ADAM29的相互作用,发现它与ADAM19结合有一定特异性,不和ADAM22,ADAM29作用.
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