多囊卵巢综合症（Polycystic ovary syndrome,PCOS）是育龄妇女常见的内分泌紊乱疾病之一，是一种多病因、多层面、表现极不均一的异质性疾病，其临床特征包括雄激素过多症、排卵功能障碍以及多囊卵巢等，患者多有不孕、月经不调、痤疮、皮脂溢性皮炎、多毛症和肥胖等症状。PCOS的发病率在6%-10%之间，根据诊断标准的不同发病率会有差异。PCOS的发病机制尚未完全清楚，目前认为与下丘脑-垂体-卵巢轴功能失常、遗传、代谢等因素有关。近年来，有研究报道机体的免疫系统可能参与了PCOS的发病过程，已证实PCOS患者机体多处于慢性低程度炎症状态，包括促炎因子分泌失调、内皮细胞功能紊乱和白细胞增多等，同时在人类的排卵前卵泡中已检测到多种免疫活性细胞，包括B细胞、T细胞和单核/巨噬细胞等。但是目前，各类免疫细胞在PCOS发病过程中的作用以及相关的调控机制仍需进一步的研究阐明。　　目的：在于利用流式细胞术检测PCOS患者及正常排卵的不孕女性卵泡液（follicular fluid,FF）中T细胞亚群的比例、活化状态和细胞因子的产量，明确在PCOS患者卵泡液中功能异常的T细胞亚群。同时进一步对相关亚群功能异常的原因进行检测，进而找出导致T细胞亚群功能异常的关键因子，为研究PCOS的发病机制提供新的实验依据，进一步证实免疫系统在其发病过程中的重要作用，同时为PCOS的治疗提供了新的思路和靶点。　　方法：选取20名经Rotterdam标准诊断为PCOS的不孕女性患者（PCOS组）；36名排除脑垂体或卵巢内分泌紊乱，以及肾上腺或甲状腺功能异常的正常排卵不孕女性作为对照（NOW组）。所有患者均进行体外受精（in-vitro fertilization,IVF）-胚胎移植或卵母细胞胞浆内单精子注射（intracytoplasmic sperm injection,ICSI）。收集所有患者的卵泡液并分离其中的淋巴细胞，用细胞表面染色法检测总T（CD3+）细胞、CD4+Th细胞、CD8+Tc细胞和CD4+CD25+T-reg细胞的比例；CD4+Th细胞、CD8+Tc细胞表面活化分子CD25和CD69的表达。卵泡液淋巴细胞经PMA和ionomycin联合处理后，利用胞内因子染色法检测CD4+Th和CD8+Tc细胞内IFN-γ和IL-17A的表达。最后，利用流式细胞术分别对CD4+Th和CD8+Tc细胞中PD-1和IL-10的表达进行了检测。　　结果：1．与NOW组相比，PCOS组患者卵泡液中CD3+T细胞的比例由66.2%±4.5%下降到54.8%±5.3%，差异具有统计学意义（P＜0.05）。在检测的3个T细胞亚群中，CD8+Tc细胞的比例显著低于NOW组（28.4%±3.5%vs.16.8%±6.2%,P＜0.01），而CD4+Th细胞和CD4+CD25+T-reg细胞的比例在两组间无明显变化(P＞0.05)。　　2．PCOS组患者卵泡液CD4+Th细胞和CD8+Tc细胞表面活化分子CD69的表达显著低于NOW组（P＜0.05,P＜0.01），而两组间CD25的表达在CD4+Th细胞和CD8+Tc细胞表面均无明显差异(P＞0.05)。　　3．经PMA和ionomycin联合处理后，PCOS组患者卵泡液CD4+Th细胞和CD8+Tc细胞表达IFN-γ的能力显著低于NOW组（P＜0.05,P＜0.01），但两种细胞亚群内IL-17A的表达在PCOS组和NOW组间均无明显变化(P＞0.05)。　　4．与PCOS组患者卵泡液CD4+Th细胞和CD8+Tc细胞功能下降一致，患者CD4+Th细胞和CD8+Tc细胞中功能抑制因子PD-1的表达显著高于NOW组，但两组间IL-10的表达在两细胞亚群内均无显著差异(P＞0.05)。　　5．PCOS组患者卵泡液CD4+Th细胞和CD8+Tc细胞功能抑制因子PD-1的表达与IFN-γ的表达呈明显的负相关性(PD-1vs.IFN-γin CD4+andCD8+T:r2=0.537and r2=0.499,respectively,P＜0.05)。　　6．PCOS组患者卵泡液CD4+Th细胞和CD8+Tc细胞功能抑制因子PD-1的表达与血清E2水平呈正相关性（PD-1on CD4+and CD8+Tvs.serum E2:r2=0.486and r2=0.512,respectively,P＜0.05）。　　结论：1.本研究表明，在PCOS患者卵泡液中，CD3+T细胞和CD8+Tc细胞的比例显著降低，CD4+Th细胞和CD8+Tc细胞的活化和功能均处于被抑制的状态。　　2.PCOS患者卵泡液中CD4+Th细胞和CD8+Tc细胞功能因子IFN-γ的表达与PD-1的表达呈明显的负相关性，因此，T细胞亚群功能的抑制可能是由PD-1介导的。　　3.反映T细胞耗竭的功能抑制因子PD-1在PCOS患者卵泡液中CD4+Th细胞和CD8+Tc细胞的表达与患者血清E2水平呈明显的正相关性，因此，T细胞耗竭可能与女性的卵母细胞发育和排卵异常有关。　　4.卵泡液T细胞亚群功能失调，尤其是细胞中IFN-γ和PD-1表达的变化可能影响了机体的卵泡成熟和正常排卵，当两者表达的失调发展到一定程度就可能会降低卵子质量和导致异常排卵。