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长春新碱等化疗药物引发的外周神经病理性疼痛(chemotherapy-induced neuropathic pain,CNP)是限制癌症化疗的剂量的主要因素。目前有关CNP的发病机制仍然不是很清楚,寻找CNP新的发病机制和有效的药物治疗靶标迫在眉睫。最近研究表明,Wnt信号通路参与骨癌诱导的疼痛等相关疼痛,但Wnt信号通路是否参与了CNP尚不清楚。本研究探索了Wnt信号通路在CNP发生发展中的作用。现将结果报告如下。(1)建立长春新碱诱导的CNP模型,利用Western blot检测CNP小鼠脊髓L4~L5中Wnt3a、磷酸化的β-catenin和去磷酸化的activeβ-catenin的表达量变化,探索CNP小鼠脊髓中的WNT/β-catenin信号通路是否被激活。结果表明,和空白组相比,VCR诱导的CNP小鼠脊髓L4~L5段Wnt3a、β-catenin和activeβ-catenin的表达量在实验的11d和18d均明显上调,差异显著(P<0.05)。(2)为了证实激活的WNT/β-catenin信号通路是否参与了CNP,我们首先通过对CNP小鼠模型注射经典的Wnt信号通路抑制剂IWR后,检测小鼠行为学实验机械性诱发痛的阈值变化。结果表明,与Vehicle组相比,经IWR处理过的CNP小鼠机械性缩足反射阈值明显上升,差异显著(P<0.05)。据此初步说明WNT/β-catenin信号通路参与了CNP(3)为了证实Wnt信号通路是否通过介导星形胶质细胞和小胶质细胞的激活参与了CNP,采用免疫荧光技术检测了脊髓背角中它们的标志蛋白GFAP和IBA-1的表达变化。结果表明,和空白组相比CNP组小鼠脊髓背角中大量活化的GFAP和IBA-1被荧光标记,差异显著(P<0.05);和Vehicle组小鼠相比经IWR处理过的CNP小鼠脊髓背角中被荧光标记的GFAP蛋白活化程度明显降低,差异显著(P<0.05)。(4)为了证实经典Wnt信号通路是否通过调节星形胶质细胞和小胶质细胞释放的炎症因子的变化参与CNP,采用ELISA实验技术检测了脊髓中TNF-α和MCP-1的蛋白表达量的变化。结果表明,和空白组相比VCR诱导组小鼠脊髓中TNF-α和MCP-1的蛋白表达量明显增高,差异显著(P<0.05);和Vehicle组小鼠相比经IWR处理过的CNP小鼠脊髓中TNF-α和MCP-1的蛋白表达量明显减少,差异显著(P<0.05)。(5)为了证实Wnt信号通路是否通过介导MAPK/ERK信号通路参与CNP,利用Western blot检测CNP小鼠脊髓L4~L5中p-ERK的表达量变化。结果表明,和空白组相比VCR诱导组小鼠脊髓中p-ERK的蛋白表达量明显上调,差异显著(P<0.05);和Vehicle组小鼠相比经IWR处理过的CNP小鼠脊髓中p-ERK的蛋白表达量明显减少,差异显著(P<0.05)。综上所述,本研究揭示了Wnt/β-catenin信号通路通过调节脊髓中的胶质细胞介导的神经炎症反应参与CNP。Wnt/β-catenin信号通路可能成为CNP新的发病机制和治疗化疗药物诱导的CNP一个有效的药物作用靶点。