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研究目的：原癌基因Bmi1在多种肿瘤类型及干细胞中都有表达,然而该基因在肝癌发生以及肝脏干细胞增殖中的作用尚不清楚。本研究试图明确：1.Bmi1在肝癌发生中的作用及其作用机制；2.Bmi1在肝脏干细胞增殖中的作用。研究方法：1.我们使用定量PCR和Western杂交检测了Bmi1肝癌组织中的表达,并使用shRNA在肝癌细胞系中抑制Bmi1的表达,从而观察Bmi1缺失对肝癌细胞系生长的影响。接着我们使用高压注射法转染Bmi1和Ras基因到小鼠中,观察Bmi1是否可以结合其它癌基因诱导肝癌发生。最后,我们结合使用肝癌组织,肝癌细胞系及原代细胞,我们分析了Bmi1是否在肝癌发生中调控Ink4A/Arf途径。2.我们利用化合物DDC在小鼠中诱导卵圆细胞增殖建立小鼠模型,通过比较野生型小鼠和Bmi1敲除小鼠中卵圆细胞增殖的差异来分析Bmi1基因对卵圆细胞增殖的影响。研究结果：1.Bmi1基因在肝细胞肝癌组织及细胞系中都存在过量表达。而当Bmi1的表达被抑制时,细胞生长明显受阻,并且细胞周期不能正常进行。为了明确Bmi1在体内促进肝癌细胞生长的机制,我们稳定表达了Bmi1和／或RasV12,一种Ras的激活形式。我们发现仅有Bmi1或者RasV12不能促进肿瘤在小鼠体内发生。而同时表达Bmi1和Ras V12则可以诱导肿瘤在肝脏中形成。重要的是,我们在体内和体外都没有发现Bmi1抑制Ink4A/Arf的证据。2.Bmi1敲除小鼠中,卵圆细胞,一种可能的肝脏干细胞的增殖存在重要缺陷。在野生型小鼠中,肝脏损失会诱导卵圆细胞大量增殖,而在Bmi1敲除小鼠中,卵圆细胞的增殖数量受到明显抑制。研究结论：1.Bmi1为肝癌肿瘤细胞生长增殖所必需,而且可以结合其它癌基因诱导肿瘤在肝脏中发生,并且其作用机制不依赖于抑制Ink4A/Arf途径；2.Bmi1为卵圆细胞增殖所必需,是介导肝脏干细胞增殖的一个重要基因。