病毒是简单的、具有生态性的细胞内寄生生物,其复制的全部过程都须依赖细胞提供的分子生态条件。病毒在宿主细胞复制增殖所需要的细胞内分子环境条件,包括细胞基因组的结构变化、表达调控以及宿主因子直接参与病毒的感染、复制的生命循环。猪瘟病毒(classical swine fever virus, CSFV)是黄病毒科(Flaviviridae)瘟病毒属(Pestivirus)重要成员,是有囊膜的单股正链RNA病毒。CSFV基因组编码Erns、E1、E2、C四个结构蛋白和Npro、p7、NS2、NS3、NS4A、NS4B、 NS5A、NS5B等八个非结构蛋白。CSFV感染猪导致以出血性高热和免疫抑制为主要特征、具有高发病率和高死亡率的烈性传染病——猪瘟(classical swine fever, CSF)。目前,CSF仍是危害我国养猪业最为严重的传染病。为了鉴定与CSFV NS5A相互作用并参与CSFV复制的宿主蛋白,本研究利用重组表达载体pEGX-6p-NS5AC诱导表达了NS5A碳端蛋白片段(NS5AC),用重组蛋白GST-NS5AC与PK-15细胞裂解蛋白共孵育,pull down细胞蛋白,用质谱分析鉴定相互作用的细胞蛋白；此外,构建了重组真核表达载体pCMV-myc-NS5AC,转染哺乳动物细胞PK-15,用免疫共沉淀和Western blot方法验证pull down、质谱分析的结果。pull down和免疫共沉淀的结果均表明,宿主细胞热休克蛋白27 (HSP27)与CSFV NS5AC相互作用。这一研究结果为进一步揭示宿主因子参与病毒复制的分子机制和开发新型疫苗和靶向预防制剂、创新防控策略提供新的思路和基础。