心血管疾病是危害全球人类健康的头号杀手,具有高发病率、高死亡率、高复发率和低龄化的特点,迫切需要建立新方法、开发新技术,研发高效创新药物以实现心血管疾病的有效防治。中药及其复方是研发高效创新药物的主要源泉,其活性成分的高特异性快速筛选则是制约药物研发的关键与瓶颈。以固定化蛋白质为核心的受体色谱法在中药活性成分筛选方面具有潜在的应用前景,其核心为如何制备高活性受体色谱固定相。本论文以中药活性成分高效筛选为目标,聚焦固定化功能蛋白质构象态杂乱不一的问题,受适配体稳定活化态受体构象的特性启发,以心血管疾病药物作用主要靶点血管紧张素ⅡⅠ型受体（AT₁R）为例,建立了高活性双位点固定化AT₁R色谱模型,并将其应用于心血管疾病经典配伍用药丹参-三七中抗高血压活性成分的筛选。本文共分为四章,作者的主要贡献如下:1. 建立了高活性双位点固定化AT₁R色谱固定相制备新方法。以AT₁R为例,通过SELEX技术对DNA随机文库进行筛选,得到与AT₁R具有高特异性和强亲和力的核酸适配体。将适配体与血管紧张素II活性肽段（AT₂（3-8））固载于大孔硅胶表面,利用AT₁R与适配体和AT₂（3-8）的双重亲和力,直接从大肠杆菌细胞裂解液中捕获AT₁R,制备双位点固定化受体色谱固定相,建立一种双位点、活化态的血管紧张素受体色谱模型。采用AT₁R的特异性工具固定化受体的配体识别活性进行表征。结果表明,双位点固定化方法可实现AT₁R的高活性、高特异性定向固定化,为高活性受体色谱模型的快速制备提供方法学借鉴。2. 以缬沙坦、伊贝沙坦、坎地沙坦、阿齐沙坦和奥美沙坦五种工具药为探针,采用直接进样法与非线性色谱法研究其与固定化AT₁R的相互作用。结果表明五种药物在固定化AT₁R色谱柱上均具有两类结合位点,亲和力大小排序为:阿齐沙坦>伊贝沙坦>缬沙坦>坎地沙坦>奥美沙坦;解离速率常数大小排序为:缬沙坦>阿齐沙坦>伊贝沙坦>坎地沙坦>奥美沙坦,该结果均与文献放射性配体免疫等方法一致,证明双位点固定化AT₁R色谱模型可应用于药物-受体相互作用研究,为AT₁R特异性靶向活性成分筛选提供色谱新方法。3. 采用双位点固定化AT₁R色谱模型对丹参-三七活性成分进行筛选,质谱法对其进行分析鉴定。结果表明三七皂苷R1、人参皂苷Rg1和迷迭香酸为丹参-三七中作用于AT₁R的活性成分,对明确丹参-三七中抗高血压活性成分具有重要意义,证明建立的双位点固定化AT₁R色谱模型可用于中药活性成分筛选研究,为复杂体系药物活性成分筛选提供了方法学借鉴。